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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20度
- 保质期：
2年
- 英文名：
pTet-On-Advanced
- 库存：
100
- 供应商：
kelei-bio
- 规格：
20μl
启动子: CMV
复制子: pUC ori
终止子: SV40 poly(A) signal，beta-globin polyA signal
质粒分类: 哺乳细胞，四环素调控系统载体
质粒大小: 7139bp
原核抗性: Amp
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃，有氧 LB
表达宿主: 哺乳细胞
诱导方式: 四环素诱导
5'测序引物: CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG
3'测序引物: 根据序列设计引物
质粒简介
pTet-On-Advanced expresses an improved version of the reverse Tet (tetracycline)-controlled transactivator protein (rtTA), called rtTA-Advanced (1–4). It is more sensitive to doxycycline (Dox) and yields lower background expression than the original rtTA used in the Tet-On® System (2). The rtTA-Advanced protein is a fusion of amino acids 1–207 of a mutant Tet repressor (TetR) and 39 amino acids containing three minimal "F"-type transcriptional activation domains from the VP16 protein of herpes simplex virus. It is fully synthetic, lacks cryptic splice sites, and is codon-optimized for stable expression in mammalian cells.
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文献和实验% 的汇合度。 2. 在合适的限制性内切酶位点使质粒线性化，并把每秒质粒的浓度调整为≥ 0.5 mg/ml 。 10 ～ 20 μ g 质粒 pTet-tTAk 和 1 ～ 2 μ g pSV2-His （ Tet 质粒与带选择标记的质粒的摩尔比大约为 10 ： 1 ）与 500 μ l HEPES 缓冲液在一个干净的 4 ml 聚丙乙烯管中混合。 3. DNA 混合物中加入 32.5 μ l 2 mol/L CaCl2 。立即轻轻振荡使溶液混匀。溶液在室温
的突变。 通过 PCR 进行基因分型也是对癌症和遗传病中的 突变进行遗传分析的一个基本方式。 3.分子克隆 PCR 被广泛应用于目标 DNA 片段的克隆，该技术被称为 PCR 克隆。在直接 PCR 克隆中，DNA（如，gDNA、cDNA、质粒 DNA）的目标区域被扩增并插入到特殊设计的兼容载体中。 图 4.PCR 克隆：通过 PCR 制备的插入片段被克隆到兼容载体中。（A） 直接 PCR 克隆技术包括 TA 和平端克隆。（B）间接 PCR 克隆，扩增子可在插入到兼容载体之前被修饰，如进行限制
组等【1】 （图片来源：Wu RQ, J Dent Res. 2011） 1.质谱技术 质谱（ Mass SPectrometry）是带电原子、分子或分子碎片按质荷比（或质量）的大小顺序排列的图谱。质谱仪是一类能使物质粒子高化成离子并通过适当的电场、磁场将它们按空间位置、时间先后或者轨道稳定与否实现质荷比分离，并检测强度后进行物质分析的仪器。质谱仪主要由分析系统、电学系统和真空系统组成。 1.1 质谱分析的基本原理 用于分析的样品分子（或原子）在离子源中离化成具有不同质量的单电行分子离子和碎片
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