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Rosetta-gami-B(DE3)大肠杆菌表达菌

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  • 2025年07月11日
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      300UL

    基因型: F–ompT hsdSB (rB– mB–) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pRARE (CamR, KanR, TetR) 基本信息: 抗性:Chl/Kan/Tet 培养基:LB 菌株类别:大肠杆菌 培养条件:37℃,有氧,LB 质粒转化:42℃热激 保存方式:20%甘油,-20℃ 基本应用:用于蛋白表达 备注: 菌株简介: Rosetta-gami B系列菌株来源于Origami B系列菌株,是集合了BL21系列,Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的优点,极大的增强了细胞内二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。Rosetta-gami B(DE3)系列菌株是来源于Origami B系列菌株,携带有TrxB和Gor基因突变,提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达。本菌株含有pRARE质粒,能够提供原Rosetta(DE3)宿主菌含有的AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个稀有密码子的tRNA,增加了真核细胞的在大肠杆菌中的蛋白表达水平。在thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变,这使得该菌株能够更加高效的在细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。TrxB和Gor基因突变使得质粒能够分别具有卡那和四环素抗性,所以本菌株无法用于卡那和四环素抗性质粒的蛋白表达。DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。

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    • 【公告】转让部分表达菌株,国内唯一!(广州)

      ): Transformation efficiency: 0.6-1 x 109 cfu/µg pUC19 DNA(这可是BL21(DE3)系列的10(6)的效率所不能比拟的,做库的时候非常有用) T7 RNA Polymerase in the lac operon - no lambda prophage(lambda prophage虽然在细菌的基因组中,但实际上是比较不稳定的,在应激的条件下,可能破坏表达菌的基因组。) Tight control of expression by lacIq allow

    • 原核表达--宿主菌株选择指南

      2系列,thioredoxin reductase (trxB)和glutathione reductase (gor)两条主要还原途径双突变菌株,显著提高细胞质中二硫键形成几率,促进蛋白可溶性及活性表达。(卡那霉素敏感)Rosetta-gami™ 2 则是综合上述两类菌株的优点,既补充7种稀有密码子,又能够促进二硫键的形成,帮助表达需要借助二硫键形成正确折叠构象的真核蛋白。(卡那霉素敏感)Origami B 是衍生自 lacZY突变的 BL21菌株,这个突变能根据IPTG的浓度精确调节表达

    • 【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)

      性不利,容易出现质粒丢失、表达水平不稳定、菌株退化乃至发生污染等情况。 我们建议: 1、长期存放菌株和pET重组子应该存在甘油-70℃保种。但是要注意高浓度甘油(>10%)会导致质粒不稳定。请尽量保持甘油浓度8%。(15%浓度的甘油保种液和新鲜菌液1:1就行)2、重组质粒不宜长期保存于表达菌株(带DE3大肠杆菌)中,请尽量使用带有recA endA突变的克隆菌株(比如C600,DH5a)进行质粒抽提和保存质粒。表达型的菌株提质粒经常会有质量不高或者背景的问题。特别是大量抽提。

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