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        【公告】转让部分表达菌株,国内唯一!(广州)

        丁香园论坛

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        因为最近做了好几个非常毒的蛋白质的表达,为了取得良好的表达效果,痛下血本买了NEB公司的T7系列的全部表达株。需要注意的是,NEB公司在中国是不卖这些细胞株的,尽管我曾经跟他们的经理表示愿意高价购买这些菌株。无奈之下,托了在美国baylor 医学院的一个朋友帮我买了四种细胞,今天凌晨带回来给我了。我在下面介绍一下这些细胞株的特点,相信战友一定能发现其很多亮点(http://www.neb.com/nebecomm/products/productC3009.asp):
        Transformation efficiency: 0.6-1 x 109 cfu/µg pUC19 DNA(这可是BL21(DE3)系列的10(6)的效率所不能比拟的,做库的时候非常有用)
        T7 RNA Polymerase in the lac operon - no lambda prophage(lambda prophage虽然在细菌的基因组中,但实际上是比较不稳定的,在应激的条件下,可能破坏表达菌的基因组。)
        Tight control of expression by lacIq allow potentially toxic genes to be cloned(LacIq就不用介绍了吧?)
        Control of T7 RNA Polymerase by mutant lysozyme (LysY) allows toxic genes to be expressed(需要注意的是这里是LysY,而不是通常的lysS,lysE,其优点见下面的说明)
        LysY is a variant of T7 lysozyme lacking amidase activity, thus cells are less susceptible to lysis during induction(只有NEB公司对T7 lysozyme 进行了这种突变,大大降低了lysozyme的毒性,细胞与BL21(DE3)plysS 相比能长到更高的密度)
        Maintenance of lysozyme plasmid does not require antibiotic selection(miniF质粒是单拷贝的,非常稳定,所以携带此质粒的菌株比BL21(DE3)plysS/plysE系列的菌株在操作,处理方面要简单很多)
        Deficient in proteases Lon and OmpT(后面这三点就不用介绍了吧?)
        Resistant to phage T1 (fhuA2)
        Does not restrict methylated DNA (McrA-, McrBC-, EcoBr-m-, Mrr-)
        B Strain
        最后说明的,我买的产品是http://www.neb.com/nebecomm/products/productC3009.asp,四种细胞株,每株细胞都有两管。我想转让其中的一半,原装的NEB的管子,有兴趣的广州网友请pm与我联系,这一半转让完了之后,我会跟帖说明,后来的战友就不要再与我联系了,我要安心做实验,如果一个月内没有广州站友联系,此公告作废。
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