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文献和实验一,酵母表达系统 毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K, 宿主菌毕赤酵母GS115 分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33 分泌型质粒pHIL-S1 二,原核表达质粒 表达宿主菌为BL21(DE3)系列 带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性 带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性 带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性 带His标签(C端):PET21
一,酵母表达系统毕赤酵母表达系统(invitrogen公司):分泌型质粒pPIC9K,宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha (甲醇诱导)宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二,原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签(N端):PET5-(a)氨苄抗性带His标签(N端):PET28-(a)卡那抗性带His标签(C端):PET24-(b)卡那抗性带His标签(C端):PET21-(a)氨苄抗性带His标签(N端)+TrxA(硫氧还蛋白):PET-32
。 Xiang Yang:EasySelect试剂盒准备了三种菌株:X33,GS115和KM71H。我倾向于选择X33,因为这个菌株转化率和表达量相对而言较高,如果你有电转仪(electroporator),可以尝试一下。如果没有的话,EasySelect也准备了化学转化试剂――EasyComp Transformation,但是由于转化率的缘故,我建议使用电转仪。 leslie:在得到了正确的序列之后就可以准备转化毕赤酵母了,试剂盒携带有的是X-33,GS115和KM71H这三种毕赤酵母(另外常用
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