| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pDONR207 |
| 质粒类型: | Gateway系统的DONR载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 低拷贝 |
| 克隆方法: | Gateway |
| 载体大小: | 5585 |
| 5' 测序引物及序列: | pDONR-F: 5'-TCGCGTTAACGCTAGCATGGATCTC-3' |
| 3' 测序引物及序列: | pDONR-R: 5'-GTAACATCAGAGATTTTGAGACAC-3' |
| 载体标签: | -- |
| 载体抗性: | 庆大霉素、 氯霉素 |
| 备注: | 载体本身含有CCDb致死基因，能够使得普通的DH5alpha等细菌死亡，必须 使用DB3.1感受态细胞进行质粒扩增，用来构建Gateway系统入门载体 ； pDONR207尽管含有pUC质粒的起始复制点，但是细菌内仍然是低产量质粒； 构建Gateway系统入门克隆时需要使用ccdB敏感的 OmniMAX2感受态细胞。 |
| 产品目录号: | -- |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥3500
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pDONR207
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
载体序列
LOCUS pDONR207 5585 bp DNA circular SYN
DEFINITION pDONR207
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5585
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gene complement(3528..4061)
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CDS complement(3528..4061)
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rep_origin 4919..5538
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ORIGIN
1 CTTTCCTGCG TTATCCCCTG ATTCTGTGGA TAACCGTATT ACCGCTAGCC AGGAAGAGTT
61 TGTAGAAACG CAAAAAGGCC ATCCGTCAGG ATGGCCTTCT GCTTAGTTTG ATGCCTGGCA
121 GTTTATGGCG GGCGTCCTGC CCGCCACCCT CCGGGCCGTT GCTTCACAAC GTTCAAATCC
181 GCTCCCGGCG GATTTGTCCT ACTCAGGAGA GCGTTCACCG ACAAACAACA GATAAAACGA
241 AAGGCCCAGT CTTCCGACTG AGCCTTTCGT TTTATTTGAT GCCTGGCAGT TCCCTACTCT
301 CGCGTTAACG CTAGCATGGA TCTCGGGCCC CAAATAATGA TTTTATTTTG ACTGATAGTG
361 ACCTGTTCGT TGCAACAAAT TGATGAGCAA TGCTTTTTTA TAATGCCAAG TTTGTACAAA
421 AAAGCAGAAC GAGAAACGTA AAATGATATA AATATCAATA TATTAAATTA GATTTTGCAT
481 AAAAAACAGA CTACATAATA CTGTAAAACA CAACATATCC AGTCACTATG AATCAACTAC
541 TTAGATGGTA TTAGTGACCT GTAGTCGACC GACAGCCTTC CAAATGTTCT TCGGGTGATG
601 CTGCCAACTT AGTCGACCGA CAGCCTTCCA AATGTTCTTC TCAAACGGAA TCGTCGTATC
661 CAGCCTACTC GCTATTGTCC TCAATGCCGT ATTAAATCAT AAAAAGAAAT AAGAAAAAGA
721 GGTGCGAGCC TCTTTTTTGT GTGACAAAAT AAAAACATCT ACCTATTCAT ATACGCTAGT
781 GTCATAGTCC TGAAAATCAT CTGCATCAAG AACAATTTCA CAACTCTTAT ACTTTTCTCT
841 TACAAGTCGT TCGGCTTCAT CTGGATTTTC AGCCTCTATA CTTACTAAAC GTGATAAAGT
901 TTCTGTAATT TCTACTGTAT CGACCTGCAG ACTGGCTGTG TATAAGGGAG CCTGACATTT
961 ATATTCCCCA GAACATCAGG TTAATGGCGT TTTTGATGTC ATTTTCGCGG TGGCTGAGAT
1021 CAGCCACTTC TTCCCCGATA ACGGAGACCG GCACACTGGC CATATCGGTG GTCATCATGC
1081 GCCAGCTTTC ATCCCCGATA TGCACCACCG GGTAAAGTTC ACGGGAGACT TTATCTGACA
1141 GCAGACGTGC ACTGGCCAGG GGGATCACCA TCCGTCGCCC GGGCGTGTCA ATAATATCAC
1201 TCTGTACATC CACAAACAGA CGATAACGGC TCTCTCTTTT ATAGGTGTAA ACCTTAAACT
1261 GCATTTCACC AGTCCCTGTT CTCGTCAGCA AAAGAGCCGT TCATTTCAAT AAACCGGGCG
1321 ACCTCAGCCA TCCCTTCCTG ATTTTCCGCT TTCCAGCGTT CGGCACGCAG ACGACGGGCT
1381 TCATTCTGCA TGGTTGTGCT TACCAGACCG GAGATATTGA CATCATATAT GCCTTGAGCA
1441 ACTGATAGCT GTCGCTGTCA ACTGTCACTG TAATACGCTG CTTCATAGCA CACCTCTTTT
1501 TGACATACTT CGGGTATACA TATCAGTATA TATTCTTATA CCGCAAAAAT CAGCGCGCAA
1561 ATACGCATAC TGTTATCTGG CTTTTAGTAA GCCGGATCCA CGCGATTACG CCCCGCCCTG
1621 CCACTCATCG CAGTACTGTT GTAATTCATT AAGCATTCTG CCGACATGGA AGCCATCACA
1681 GACGGCATGA TGAACCTGAA TCGCCAGCGG CATCAGCACC TTGTCGCCTT GCGTATAATA
1741 TTTGCCCATG GTGAAAACGG GGGCGAAGAA GTTGTCCATA TTGGCCACGT TTAAATCAAA
1801 ACTGGTGAAA CTCACCCAGG GATTGGCTGA GACGAAAAAC ATATTCTCAA TAAACCCTTT
1861 AGGGAAATAG GCCAGGTTTT CACCGTAACA CGCCACATCT TGCGAATATA TGTGTAGAAA
1921 CTGCCGGAAA TCGTCGTGGT ATTCACTCCA GAGCGATGAA AACGTTTCAG TTTGCTCATG
1981 GAAAACGGTG TAACAAGGGT GAACACTATC CCATATCACC AGCTCACCGT CTTTCATTGC
2041 CATACGGAAT TCCGGATGAG CATTCATCAG GCGGGCAAGA ATGTGAATAA AGGCCGGATA
2101 AAACTTGTGC TTATTTTTCT TTACGGTCTT TAAAAAGGCC GTAATATCCA GCTGAACGGT
2161 CTGGTTATAG GTACATTGAG CAACTGACTG AAATGCCTCA AAATGTTCTT TACGATGCCA
2221 TTGGGATATA TCAACGGTGG TATATCCAGT GATTTTTTTC TCCATTTTAG CTTCCTTAGC
2281 TCCTGAAAAT CTCGATAACT CAAAAAATAC GCCCGGTAGT GATCTTATTT CATTATGGTG
2341 AAAGTTGGAA CCTCTTACGT GCCGATCAAC GTCTCATTTT CGCCAAAAGT TGGCCCAGGG
2401 CTTCCCGGTA TCAACAGGGA CACCAGGATT TATTTATTCT GCGAAGTGAT CTTCCGTCAC
2461 AGGTATTTAT TCGGCGCAAA GTGCGTCGGG TGATGCTGCC AACTTAGTCG ACTACAGGTC
2521 ACTAATACCA TCTAAGTAGT TGATTCATAG TGACTGGATA TGTTGTGTTT TACAGTATTA
2581 TGTAGTCTGT TTTTTATGCA AAATCTAATT TAATATATTG ATATTTATAT CATTTTACGT
2641 TTCTCGTTCA GCTTTCTTGT ACAAAGTGGG CATTATAAGA AAGCATTGCT TATCAATTTG
2701 TTGCAACGAA CAGGTCACTA TCAGTCAAAA TAAAATCATT ATTTGCCATC CAGCTGCAGC
2761 TCTGGCCCGT GTCTCAAAAT CTCTGATGTT ACATTGCACA AGATAAAAAT ATATCATCAT
2821 GAACAATAAA ACTGTCTGCT TACATAAACA GTAATACAAG GGGTGTTATG AGCCATATTC
2881 AACGGGAAAC GTCGAGGCCG CGATTAAATT CCAACATGGA TGCTGATTTA TATGGGTATA
2941 AATGGGCTCG CGATAATGTC GGGCAATCAG GTGCGACAAT CTATCGCTTG TATGGGAAGC
3001 CCGATGCGCC AGAGTTGTTT CTGAAACATG GCAAAGGTAG CGTTGCCAAT GATGTTACAG
3061 ATGAGATGGT CAGACTAAAC TGGCTGACGG AATTTATGCC TCTTCCGACC ATCAAGCATT
3121 TTATCCGTAC TCCTGATGAT GCATGGTTAC TCACCACTGC GATCCCCGGA AAAACAGCAT
3181 TCCAGGTATT AGAAGAATAT CCTGATTCAG GTGAAAATAT TGTTGATGCG CTGGCAGTGT
3241 TCCTGCGCCG GTTGCATTCG ATTCCTGTTT GTAATTGTCC TTTTAACAGC GATCGCGTAT
3301 TTCGTCTCGC TCAGGCGCAA TCACGAATGA ATAACGGTTT GGTTGATGCG AGTGATTTTG
3361 ATGACGAGCG TAATGGCTGG CCTGTTGAAC AAGTCTGGAA AGAAATGCAT AAACTTTTGC
3421 CATTCTCACC GGATTCAGTC GTCACTCATG GTGATTTCTC ACTTGATAAC CTTATTTTTG
3481 ACGAGGGGAA ATTAGGCCGG GAAGCCGATC TCGGCTTGAA CGAATTGTTA GGTGGCGGTA
3541 CTTGGGTCGA TATCAAAGTG CATCACTTCT TCCCGTATGC CCAACTTTGT ATAGAGAGCC
3601 ACTGCGGGAT CGTCACCGTA ATCTGCTTGC ACGTAGATCA CATAAGCACC AAGCGCGTTG
3661 GCCTCATGCT TGAGGAGATT GATGAGCGCG GTGGCAATGC CCTGCCTCCG GTGCTCGCCG
3721 GAGACTGCGA GATCATAGAT ATAGATCTCA CTACGCGGCT GCTCAAACCT GGGCAGAACG
3781 TAAGCCGCGA GAGCGCCAAC AACCGCTTCT TGGTCGAAGG CAGCAAGCGC GATGAATGTC
3841 TTACTACGGA GCAAGTTCCC GAGGTAATCG GAGTCCGGCT GATGTTGGGA GTAGGTGGCT
3901 ACGTCTCCGA ACTCACGACC GAAAAGATCA AGAGCAGCCC GCATGGATTT GACTTGGTCA
3961 GGGCCGAGCC TACATGTGCG AATGATGCCC ATACTTGAGC CACCTAACTT TGTTTTAGGG
4021 CGACTGCCCT GCTGCGTAAC ATCGTTGCTG CTGCGTAACA TCGTTGCTGC TCCATAACAT
4081 CAAACATCGA CCCACGGCGT AACGCGCTTG CTGCTTGGAT GCCCGAGGCA TAGACTGTAC
4141 AAAAAAACAG TCATAACAAG CCATGAAAAC CGCCACTGCG CCGTTACCAC CGCTGCGTTC
4201 GGTCAAGGTT CTGGACCAGT TGCGTGAGCG CATACGCTAC TTGCATTACA GTTTACGAAC
4261 CGAACAGGCT TATGTCAACT GGGTTCGTGC CTTCATCCGT TTCCACGGTG TGCGTCACCC
4321 GGCAACCTTG GGCAGCAGCG AAGTCGAGGC ATTTCTGTCC TGGCTGGCGA ACGAGCGCAA
4381 GGTTTCGGTC TCCACGCATC GTCAGGCATT GGCGGCCTTG CTGTTCTTCT ACGGCAAGGT
4441 GCTGTGCACG GATCTGCCCT GGCTTCAGGA GATCGGAAGA CCTCGGCCGT CGCGGCGCTT
4501 GCCGGTGGTG CTGACCCCGG ATGAAGTGGT TCGCATCCTC GGTTTTCTGG AAGGCGAGCA
4561 TCGTTTGTTC GCCCAGGACT CTAGCTATAG TTCTAGTGGT TGGCTACTAA TAGGTTGTAT
4621 TGATGTTGGA CGAGTCGGAA TCGCAGACCG ATACCAGGAT CTTGCCATCC TATGGAACTG
4681 CCTCGGTGAG TTTTCTCCTT CATTACAGAA ACGGCTTTTT CAAAAATATG GTATTGATAA
4741 TCCTGATATG AATAAATTGC AGTTTCATTT GATGCTCGAT GAGTTTTTCT AATCAGAATT
4801 GGTTAATTGG TTGTAACACT GGCAGAGCAT TACGCTGACT TGACGGGACG GCGCAAGCTC
4861 ATGACCAAAA TCCCTTAACG TGAGTTTTCG TTCCACTGAG CGTCAGACCC CGTAGAAAAG
4921 ATCAAAGGAT CTTCTTGAGA TCCTTTTTTT CTGCGCGTAA TCTGCTGCTT GCAAACAAAA
4981 AAACCACCGC TACCAGCGGT GGTTTGTTTG CCGGATCAAG AGCTACCAAC TCTTTTTCCG
5041 AAGGTAACTG GCTTCAGCAG AGCGCAGATA CCAAATACTG TCCTTCTAGT GTAGCCGTAG
5101 TTAGGCCACC ACTTCAAGAA CTCTGTAGCA CCGCCTACAT ACCTCGCTCT GCTAATCCTG
5161 TTACCAGTGG CTGCTGCCAG TGGCGATAAG TCGTGTCTTA CCGGGTTGGA CTCAAGACGA
5221 TAGTTACCGG ATAAGGCGCA GCGGTCGGGC TGAACGGGGG GTTCGTGCAC ACAGCCCAGC
5281 TTGGAGCGAA CGACCTACAC CGAACTGAGA TACCTACAGC GTGAGCTATG AGAAAGCGCC
5341 ACGCTTCCCG AAGGGAGAAA GGCGGACAGG TATCCGGTAA GCGGCAGGGT CGGAACAGGA
5401 GAGCGCACGA GGGAGCTTCC AGGGGGAAAC GCCTGGTATC TTTATAGTCC TGTCGGGTTT
5461 CGCCACCTCT GACTTGAGCG TCGATTTTTG TGATGCTCGT CAGGGGGGCG GAGCCTATGG
5521 AAAAACGCCA GCAACGCGGC CTTTTTACGG TTCCTGGCCT TTTGCTGGCC TTTTGCTCAC
5581 ATGTT
//
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文献和实验相关实验
用传统的限制酶切和连接的方法产生入门克隆。这些载体配合合适的目的载体，可以用于表达天然蛋白或带有N端或C端融合标签的重组蛋白。为了在真核细胞中有效地翻译蛋白，所有的5个Gateway入门载体提供了Kozak 序列。此外，pENTR11提供了SD （Shine-Dalgarno）序列，便于在大肠杆菌中有效的翻译。2、PCR重组克隆 重组是从PCR产物创建Gateway入门克隆的另一种方法。这种方法是通过合并attB位点到上游和下游引物上，然后共同孵育PCR扩增产物和pDONR载体（包含attP位点
是线性的，如果用质粒必须做酶切，但是事实证明用超螺旋的质粒结果没有区别。5. 同理，用引物在目的基因上下游加入AttL序列后直接进行LR反应也是可行的，可以省去BP反应相关的材料和费用。但是pDONR系列载体自有其优点（载体小，拷贝数高，卡那霉素抗性，容易测序），所以要按实际情况权衡6. 慢病毒载体的空白质粒有大量的重复序列，久存会导致LR反应成功但是转化后抽不出质粒的情况，需要注意。
3. 用SuperScript™ II逆转录酶合成第一链和第二链cDNA 4. 连接attB1接头 5. 加上接头的cDNA和pDONR™222载体混合在BP Clonase™酶存在时构建入门文库 6. 得到的入门克隆有attL位点；产生的副产物是自由的ccdB基因 7. 转化E.coli并选择抗卡那霉素的克隆
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pDONR207载体
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