| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pDEST15 |
| 质粒类型: | Gateway载体;大肠杆菌表达载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 低拷贝 |
| 启动子: | T7 |
| 克隆方法: | Gateway |
| 载体大小: | 7013bp |
| 5' 测序引物及序列: | T7 Fwd: 5'd[TAATACGACTCACTATAGGG]3' |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | GST (Nterm) |
| 载体抗性: | Ampicillin、 |
| 备注: | pDEST15易于克隆到其他载体中去; 表达水平可以被严格控制; BL21-AI在阿拉伯糖诱下表达T7聚合酶,识别T7启动子,因此表达蛋白时必须向培养基中加入阿拉伯糖进行诱导。 入门克隆的构建需要用pDONR221 载体 |
| 产品目录号: | 11802014 |
| 稳定性: | 瞬表达 |
| 组成型: | 组成型 |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃低温保存
- 保质期:
三年
- 英文名:
pDEST15
- 库存:
20
- 供应商:
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息



载体简介
载体序列
LOCUS pDEST15 Gateway 7013 bp DNA SYN
DEFINITION pDEST15 Gateway
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7013
/organism="pDEST15 Gateway"
/mol_type="other DNA"
promoter 25..43
/label="T7_promoter"
misc_feature 80..96
/label="T7_transl_en_RBS"
gene 105..764
/label="GST (variant)"
/gene="GST (variant)"
CDS 105..827
/label="ORF frame 3"
misc_feature 792..916
/label="attR1"
misc_feature complement(816..916)
/label="attR2"
promoter 941..964
/label="lac_promoter"
gene 1025..1684
/label="CAT/CamR"
/gene="CAT/CamR"
CDS 1025..1684
/label="ORF frame 2"
misc_feature 2026..2331
/label="ccdB"
misc_feature complement(2372..2479)
/label="attR1"
misc_feature 2372..2472
/label="attR2"
terminator 2518..2646
/label="T7_terminator"
misc_feature complement(2560..2578)
/label="T7_Terminal_primer"
gene complement(2649..2939)
/label="tet (1190 - 900)"
/gene="tet (1190 - 900)"
promoter 3163..3191
/label="AmpR_promoter"
gene 3233..4093
/label="Ampicillin"
/gene="Ampicillin"
CDS 3233..4093
/label="ORF frame 2"
rep_origin 4248..4867
/label="pBR322_origin"
misc_feature 5266..5288
/label="pGEX_3_primer"
misc_feature complement(5282..5473)
/label="ROP"
CDS complement(6112..6729)
/label="ORF frame 3"
CDS 6307..6792
/label="ORF frame 1"
CDS complement(6314..6901)
/label="ORF frame 2"
misc_feature 6935..6954
/label="pBRrevBam_primer"
ORIGIN
1 ATCGAGATCT CGATCCCGCG AAATTAATAC GACTCACTAT AGGGAGACCA CAACGGTTTC
61 CCTCTAGAAA TAATTTTGTT TAACTTTAAG AAGGAGATAT ACATATGTCC CCTATACTAG
121 GTTATTGGAA AATTAAGGGC CTTGTGCAAC CCACTCGACT TCTTTTGGAA TATCTTGAAG
181 AAAAATATGA AGAGCATTTG TATGAGCGCG ATGAAGGTGA TAAATGGCGA AACAAAAAGT
241 TTGAATTGGG TTTGGAGTTT CCCAATCTTC CTTATTATAT TGATGGTGAT GTTAAATTAA
301 CACAGTCTAT GGCCATCATA CGTTATATAG CTGACAAGCA CAACATGTTG GGTGGTTGTC
361 CAAAAGAGCG TGCAGAGATT TCAATGCTTG AAGGAGCGGT TTTGGATATT AGATACGGTG
421 TTTCGAGAAT TGCATATAGT AAAGACTTTG AAACTCTCAA AGTTGATTTT CTTAGCAAGC
481 TACCTGAAAT GCTGAAAATG TTCGAAGATC GTTTATGTCA TAAAACATAT TTAAATGGTG
541 ATCATGTAAC CCATCCTGAC TTCATGTTGT ATGACGCTCT TGATGTTGTT TTATACATGG
601 ACCCAATGTG CCTGGATGCG TTCCCAAAAT TAGTTTGTTT TAAAAAACGT ATTGAAGCTA
661 TCCCACAAAT TGATAAGTAC TTGAAATCCA GCAAGTATAT AGCATGGCCT TTGCAGGGCT
721 GGCAAGCCAC GTTTGGTGGT GGCGACCATC CTCCAAAATC GGATCTGGTT CCGCGTCCAT
781 GGTCGAATCA AACAAGTTTG TACAAAAAAG CTGAACGAGA AACGTAAAAT GATATAAATA
841 TCAATATATT AAATTAGATT TTGCATAAAA AACAGACTAC ATAATACTGT AAAACACAAC
901 ATATCCAGTC ACTATGGCGG CCGCATTAGG CACCCCAGGC TTTACACTTT ATGCTTCCGG
961 CTCGTATAAT GTGTGGATTT TGAGTTAGGA TCCGTCGAGA TTTTCAGGAG CTAAGGAAGC
1021 TAAAATGGAG AAAAAAATCA CTGGATATAC CACCGTTGAT ATATCCCAAT GGCATCGTAA
1081 AGAACATTTT GAGGCATTTC AGTCAGTTGC TCAATGTACC TATAACCAGA CCGTTCAGCT
1141 GGATATTACG GCCTTTTTAA AGACCGTAAA GAAAAATAAG CACAAGTTTT ATCCGGCCTT
1201 TATTCACATT CTTGCCCGCC TGATGAATGC TCATCCGGAA TTCCGTATGG CAATGAAAGA
1261 CGGTGAGCTG GTGATATGGG ATAGTGTTCA CCCTTGTTAC ACCGTTTTCC ATGAGCAAAC
1321 TGAAACGTTT TCATCGCTCT GGAGTGAATA CCACGACGAT TTCCGGCAGT TTCTACACAT
1381 ATATTCGCAA GATGTGGCGT GTTACGGTGA AAACCTGGCC TATTTCCCTA AAGGGTTTAT
1441 TGAGAATATG TTTTTCGTCT CAGCCAATCC CTGGGTGAGT TTCACCAGTT TTGATTTAAA
1501 CGTGGCCAAT ATGGACAACT TCTTCGCCCC CGTTTTCACC ATGGGCAAAT ATTATACGCA
1561 AGGCGACAAG GTGCTGATGC CGCTGGCGAT TCAGGTTCAT CATGCCGTCT GTGATGGCTT
1621 CCATGTCGGC AGAATGCTTA ATGAATTACA ACAGTACTGC GATGAGTGGC AGGGCGGGGC
1681 GTAATCTAGA GGATCCGGCT TACTAAAAGC CAGATAACAG TATGCGTATT TGCGCGCTGA
1741 TTTTTGCGGT ATAAGAATAT ATACTGATAT GTATACCCGA AGTATGTCAA AAAGAGGTGT
1801 GCTATGAAGC AGCGTATTAC AGTGACAGTT GACAGCGACA GCTATCAGTT GCTCAAGGCA
1861 TATATGATGT CAATATCTCC GGTCTGGTAA GCACAACCAT GCAGAATGAA GCCCGTCGTC
1921 TGCGTGCCGA ACGCTGGAAA GCGGAAAATC AGGAAGGGAT GGCTGAGGTC GCCCGGTTTA
1981 TTGAAATGAA CGGCTCTTTT GCTGACGAGA ACAGGGACTG GTGAAATGCA GTTTAAGGTT
2041 TACACCTATA AAAGAGAGAG CCGTTATCGT CTGTTTGTGG ATGTACAGAG TGATATTATT
2101 GACACGCCCG GGCGACGGAT GGTGATCCCC CTGGCCAGTG CACGTCTGCT GTCAGATAAA
2161 GTCTCCCGTG AACTTTACCC GGTGGTGCAT ATCGGGGATG AAAGCTGGCG CATGATGACC
2221 ACCGATATGG CCAGTGTGCC GGTCTCCGTT ATCGGGGAAG AAGTGGCTGA TCTCAGCCAC
2281 CGCGAAAATG ACATCAAAAA CGCCATTAAC CTGATGTTCT GGGGAATATA AATGTCAGGC
2341 TCCCTTATAC ACAGCCAGTC TGCAGGTCGA CCATAGTGAC TGGATATGTT GTGTTTTACA
2401 GTATTATGTA GTCTGTTTTT TATGCAAAAT CTAATTTAAT ATATTGATAT TTATATCATT
2461 TTACGTTTCT CGTTCAGCTT TCTTGTACAA AGTGGTTTGA TTCGACCCGG GATCCGGCTG
2521 CTAACAAAGC CCGAAAGGAA GCTGAGTTGG CTGCTGCCAC CGCTGAGCAA TAACTAGCAT
2581 AACCCCTTGG GGCCTCTAAA CGGGTCTTGA GGGGTTTTTT GCTGAAAGGA GGAACTATAT
2641 CCGGATATCC ACAGGACGGG TGTGGTCGCC ATGATCGCGT AGTCGATAGT GGCTCCAAGT
2701 AGCGAAGCGA GCAGGACTGG GCGGCGGCCA AAGCGGTCGG ACAGTGCTCC GAGAACGGGT
2761 GCGCATAGAA ATTGCATCAA CGCATATAGC GCTAGCAGCA CGCCATAGTG ACTGGCGATG
2821 CTGTCGGAAT GGACGATATC CCGCAAGAGG CCCGGCAGTA CCGGCATAAC CAAGCCTATG
2881 CCTACAGCAT CCAGGGTGAC GGTGCCGAGG ATGACGATGA GCGCATTGTT AGATTTCATA
2941 CACGGTGCCT GACTGCGTTA GCAATTTAAC TGTGATAAAC TACCGCATTA AAGCTTATCG
3001 ATGATAAGCT GTCAAACATG AGAATTCTTG AAGACGAAAG GGCCTCGTGA TACGCCTATT
3061 TTTATAGGTT AATGTCATGA TAATAATGGT TTCTTAGACG TCAGGTGGCA CTTTTCGGGG
3121 AAATGTGCGC GGAACCCCTA TTTGTTTATT TTTCTAAATA CATTCAAATA TGTATCCGCT
3181 CATGAGACAA TAACCCTGAT AAATGCTTCA ATAATATTGA AAAAGGAAGA GTATGAGTAT
3241 TCAACATTTC CGTGTCGCCC TTATTCCCTT TTTTGCGGCA TTTTGCCTTC CTGTTTTTGC
3301 TCACCCAGAA ACGCTGGTGA AAGTAAAAGA TGCTGAAGAT CAGTTGGGTG CACGAGTGGG
3361 TTACATCGAA CTGGATCTCA ACAGCGGTAA GATCCTTGAG AGTTTTCGCC CCGAAGAACG
3421 TTTTCCAATG ATGAGCACTT TTAAAGTTCT GCTATGTGGC GCGGTATTAT CCCGTGTTGA
3481 CGCCGGGCAA GAGCAACTCG GTCGCCGCAT ACACTATTCT CAGAATGACT TGGTTGAGTA
3541 CTCACCAGTC ACAGAAAAGC ATCTTACGGA TGGCATGACA GTAAGAGAAT TATGCAGTGC
3601 TGCCATAACC ATGAGTGATA ACACTGCGGC CAACTTACTT CTGACAACGA TCGGAGGACC
3661 GAAGGAGCTA ACCGCTTTTT TGCACAACAT GGGGGATCAT GTAACTCGCC TTGATCGTTG
3721 GGAACCGGAG CTGAATGAAG CCATACCAAA CGACGAGCGT GACACCACGA TGCCTGCAGC
3781 AATGGCAACA ACGTTGCGCA AACTATTAAC TGGCGAACTA CTTACTCTAG CTTCCCGGCA
3841 ACAATTAATA GACTGGATGG AGGCGGATAA AGTTGCAGGA CCACTTCTGC GCTCGGCCCT
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文献和实验蛋白相互作用的一种有效工具。在ProQuest™系统中加入GateWay™技术,使您仅通过一个克隆步骤就可以在多个表达系统中表达可能的相互作用子蛋白,从而简化了下游的基因分析 ProQuest™工作原理 ProQuest™系统依靠报告基因的转录激活来鉴定蛋白相互作用。将一个基因克隆到"诱饵"载体,pDEST™ 32,并和GAL4蛋白的DNA结合域(DBD)表达为融合蛋白。将第二个基因或者编码可能的相互作用子蛋白的cDNA文库克隆到"猎物"载体,pDEST™ 22,同GAL4的转录
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片段单酶切后,在 DNA 片段两端是互补的粘端。DNA 片段插入载体时具有正反两个方向。③平齐末端连接需要在 DNA5'-端去磷酸化,否则线性载体 DNA 分子将发生自身环化连接。(一)5'-端去磷酸化反应通常只对载体 DNA 分子进行 5'-端去磷酸化反应就基本可以避免自身环化连接。【实验试剂与器材】1. 小牛肠磷酸酶 (Calf intestine phosphatase ,CIP)2. 10×CIP 缓冲液【实验方法与步骤】1. 酶切 DNA 反应,在 75 ℃ 加热 15 min 灭活
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