| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pENTR2B |
| 质粒类型: | Gateway载体；入门载体 |
| 高拷贝/低拷贝: | 高拷贝 |
| 启动子: | 无 |
| 克隆方法: | 限制性内切酶；多克隆位点 |
| 载体大小: | 2718 bp |
| 5' 测序引物及序列: | -- |
| 3' 测序引物及序列: | -- |
| 载体标签: | 无 |
| 载体抗性: | 卡那霉素 |
| 真核筛选标记: | 无 |
| 备注: | pENTR2B载体本身含有CCDb致死基因，能够使得普通的DH5alpha等细菌死亡，必须使用DB3.1感受态细胞进行质粒扩增； 构建Gateway系统入门克隆时需要使用ccdB敏感的 OmniMAX2感受态细胞。 |
| 产品目录号: | -- |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
- ¥1000
- ZYbscience
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃低温保存
- 保质期：
三年
- 英文名：
pENTR2B
- 库存：
20
- 供应商：
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
载体序列
LOCUS pENTR2B 2718 bp DNA SYN
DEFINITION pENTR2B
ACCESSION
KEYWORDS
SOURCE
ORGANISM other sequences; artificial sequences; vectors.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..2718
/organism="pENTR2B"
/mol_type="other DNA"
terminator 106..149
/label="rrnB_T1_terminator"
terminator 281..308
/label="rrnB_T2_terminator"
misc_feature complement(358..441)
/label="attL2"
misc_feature complement(358..457)
/label="attL1"
misc_feature 613..912
/label="ccdB"
misc_feature 947..1046
/label="attL2"
gene 1169..1978
/label="KanR2"
/gene="KanR2"
CDS 1169..1978
/label="ORF frame 2"
/translation="MSHIQRETSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYGK
PDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVD
ASDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRV
GIADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF*"
rep_origin 2052..2671
/label="pBR322_origin"
/translation="MSHIQRETSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYGK
PDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVD
ASDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRV
GIADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF*"
ORIGIN
1 CTTTCCTGCG TTATCCCCTG ATTCTGTGGA TAACCGTATT ACCGCTAGCA TGGATCTCGG
61 GGACGTCTAA CTACTAAGCG AGAGTAGGGA ACTGCCAGGC ATCAAATAAA ACGAAAGGCT
121 CAGTCGGAAG ACTGGGCCTT TCGTTTTATC TGTTGTTTGT CGGTGAACGC TCTCCTGAGT
181 AGGACAAATC CGCCGGGAGC GGATTTGAAC GTTGTGAAGC AACGGCCCGG AGGGTGGCGG
241 GCAGGACGCC CGCCATAAAC TGCCAGGCAT CAAACTAAGC AGAAGGCCAT CCTGACGGAT
301 GGCCTTTTTG CGTTTCTACA AACTCTTCCT GTTAGTTAGT TACTTAAGCT CGGGCCCCAA
361 ATAATGATTT TATTTTGACT GATAGTGACC TGTTCGTTGC AACAAATTGA TAAGCAATGC
421 TTTTTTATAA TGCCAACTTT GTACAAAAAA GCAGGCTGGC GCCGGAACCA ATTCAGTCGA
481 CTGGATCCGG TACCGAATTC GCTTACTAAA AGCCAGATAA CAGTATGCGT ATTTGCGCGC
541 TGATTTTTGC GGTATAAGAA TATATACTGA TATGTATACC CGAAGTATGT CAAAAAGAGG
601 TGTGCTTCTA GAATGCAGTT TAAGGTTTAC ACCTATAAAA GAGAGAGCCG TTATCGTCTG
661 TTTGTGGATG TACAGAGTGA TATTATTGAC ACGCCCGGGC GACGGATGGT GATCCCCCTG
721 GCCAGTGCAC GTCTGCTGTC AGATAAAGTC TCCCGTGAAC TTTACCCGGT GGTGCATATC
781 GGGGATGAAA GCTGGCGCAT GATGACCACC GATATGGCCA GTGTGCCGGT CTCCGTTATC
841 GGGGAAGAAG TGGCTGATCT CAGCCACCGC GAAAATGACA TCAAAAACGC CATTAACCTG
901 ATGTTCTGGG GAATATAGAA TTCGCGGCCG CACTCGAGAT ATCTAGACCC AGCTTTCTTG
961 TACAAAGTTG GCATTATAAG AAAGCATTGC TTATCAATTT GTTGCAACGA ACAGGTCACT
1021 ATCAGTCAAA ATAAAATCAT TATTTGCCAT CCAGCTGCAG CTCTGGCCCG TGTCTCAAAA
1081 TCTCTGATGT TACATTGCAC AAGATAAAAA TATATCATCA TGAACAATAA AACTGTCTGC
1141 TTACATAAAC AGTAATACAA GGGGTGTTAT GAGCCATATT CAACGGGAAA CGTCGAGGCC
1201 GCGATTAAAT TCCAACATGG ATGCTGATTT ATATGGGTAT AAATGGGCTC GCGATAATGT
1261 CGGGCAATCA GGTGCGACAA TCTATCGCTT GTATGGGAAG CCCGATGCGC CAGAGTTGTT
1321 TCTGAAACAT GGCAAAGGTA GCGTTGCCAA TGATGTTACA GATGAGATGG TCAGACTAAA
1381 CTGGCTGACG GAATTTATGC CTCTTCCGAC CATCAAGCAT TTTATCCGTA CTCCTGATGA
1441 TGCATGGTTA CTCACCACTG CGATCCCCGG AAAAACAGCA TTCCAGGTAT TAGAAGAATA
1501 TCCTGATTCA GGTGAAAATA TTGTTGATGC GCTGGCAGTG TTCCTGCGCC GGTTGCATTC
1561 GATTCCTGTT TGTAATTGTC CTTTTAACAG CGATCGCGTA TTTCGTCTCG CTCAGGCGCA
1621 ATCACGAATG AATAACGGTT TGGTTGATGC GAGTGATTTT GATGACGAGC GTAATGGCTG
1681 GCCTGTTGAA CAAGTCTGGA AAGAAATGCA TAAACTTTTG CCATTCTCAC CGGATTCAGT
1741 CGTCACTCAT GGTGATTTCT CACTTGATAA CCTTATTTTT GACGAGGGGA AATTAATAGG
1801 TTGTATTGAT GTTGGACGAG TCGGAATCGC AGACCGATAC CAGGATCTTG CCATCCTATG
1861 GAACTGCCTC GGTGAGTTTT CTCCTTCATT ACAGAAACGG CTTTTTCAAA AATATGGTAT
1921 TGATAATCCT GATATGAATA AATTGCAGTT TCATTTGATG CTCGATGAGT TTTTCTAATC
1981 AGAATTGGTT AATTGGTTGT AACATTATTC AGATTGGGCC CCGTTCCACT GAGCGTCAGA
2041 CCCCGTAGAA AAGATCAAAG GATCTTCTTG AGATCCTTTT TTTCTGCGCG TAATCTGCTG
2101 CTTGCAAACA AAAAAACCAC CGCTACCAGC GGTGGTTTGT TTGCCGGATC AAGAGCTACC
2161 AACTCTTTTT CCGAAGGTAA CTGGCTTCAG CAGAGCGCAG ATACCAAATA CTGTTCTTCT
2221 AGTGTAGCCG TAGTTAGGCC ACCACTTCAA GAACTCTGTA GCACCGCCTA CATACCTCGC
2281 TCTGCTAATC CTGTTACCAG TGGCTGCTGC CAGTGGCGAT AAGTCGTGTC TTACCGGGTT
2341 GGACTCAAGA CGATAGTTAC CGGATAAGGC GCAGCGGTCG GGCTGAACGG GGGGTTCGTG
2401 CACACAGCCC AGCTTGGAGC GAACGACCTA CACCGAACTG AGATACCTAC AGCGTGAGCT
2461 ATGAGAAAGC GCCACGCTTC CCGAAGGGAG AAAGGCGGAC AGGTATCCGG TAAGCGGCAG
2521 GGTCGGAACA GGAGAGCGCA CGAGGGAGCT TCCAGGGGGA AACGCCTGGT ATCTTTATAG
2581 TCCTGTCGGG TTTCGCCACC TCTGACTTGA GCGTCGATTT TTGTGATGCT CGTCAGGGGG
2641 GCGGAGCCTA TGGAAAAACG CCAGCAACGC GGCCTTTTTA CGGTTCCTGG CCTTTTGCTG
2701 GCCTTTTGCT CACATGTT
//
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文献和实验相关实验
-29b 对肾脏纤维化的影响。 实验结果 AAV 血清型选择：体外细胞实验结果显示 rAAV1、2 和 6 是适合靶向肾细胞的 AAV 血清型，小鼠体内实验结果显示 rAAV6 是最合适的载体。 图 6 rAAV6 载体适合在小鼠体内进行肾脏靶向基因递送 miR-29b 对肾脏纤维化的影响：miR-29b 在体外抑制了 TGF-β1 诱导的肾细胞纤维化。在 UUO 小鼠模型中，rAAV6 介导的 miR-29b 递送可以抑制肾脏纤维化和 Snail1 的表达。 图 7 rAAV6 介导
系列）：高拷贝会导致大片段质粒复制压力大，易丢失或断裂，优先用低拷贝载体（如 pACYC184，拷贝数 10-15）或大片段专用载体（如 BAC 载体 pBeloBAC11，可容纳 100kb 以上片段，在大肠杆菌中稳定存在）； ④选择合适的连接方法，比如 Gibson 组装（无缝克隆）的方法更适合 10-20kb 大片段的连接，相比传统的 T4 连接的方法，成功率更高，操作更简便； ⑤选择重组缺陷型感受态，提高大质粒的转化效率，如 Stbl3、DH10B 等，此外转化方式也会影响转化
样（比如 GeneArt EX 超长版就建议用 DH10B 电转感受态细胞）。市面上有多种为满足不同需求而优化条件的商品化组装克隆试剂盒，可以根据自己的需求选出最合适自己需要的——选对合适的 Kit ，每天都是好心情，实验高歌猛进充满成就感；选不合适就只能天天 re-search 了——反反复复来来回回(re-)地摸索(search)尝试，挺折磨的。选择kit时一般留意几个参数：插入片段长度，单次反应可插入片段数量，同源序列长度——即合成引物时要求添加的载体同源序列长度，反应时间，当然还有克隆效率（几个领先品牌的产品
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