- ¥1000
- XYbscience
- 中国/美国
- XY2034
- 2025年07月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pDEST15
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | Gateway载体 |
|---|---|
| 启动子: | T7 |
| 克隆方法: | Gateway |
| 载体大小: | 7013 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | T7 Fwd: 5'd[TAATACGACTCACTATAGGG]3' |
| 载体标签: | GST Tag |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY2034 | pDEST15 | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
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文献和实验蛋白相互作用的一种有效工具。在ProQuest™系统中加入GateWay™技术，使您仅通过一个克隆步骤就可以在多个表达系统中表达可能的相互作用子蛋白，从而简化了下游的基因分析 ProQuest™工作原理 ProQuest™系统依靠报告基因的转录激活来鉴定蛋白相互作用。将一个基因克隆到"诱饵"载体，pDEST™ 32，并和GAL4蛋白的DNA结合域（DBD）表达为融合蛋白。将第二个基因或者编码可能的相互作用子蛋白的cDNA文库克隆到"猎物"载体，pDEST™ 22，同GAL4的转录
Step 2 · 根据线性化载体两端的序列，设计目标片段的引物——划重点！这对引物外侧要有 15-40 碱基与载体两端分别同源，内侧要有 15-20 个碱基与目标片段同源。如果想要设计启动子 SD 序列跟 ATG 的距离，这就是好机会。合成引物不要超过 65 个碱基为好。 · Step 3 · 以这对引物PCR目标基因，就能得到两端与载体同源的目标片段。按比例混合片段和线性化载体，加入关键试剂——预混酶并在 50 度保温 15-60 分钟（因插入片段数量而略有不同，以操作手册为准）——以赛默
片段单酶切后，在 DNA 片段两端是互补的粘端。DNA 片段插入载体时具有正反两个方向。③平齐末端连接需要在 DNA5'-端去磷酸化，否则线性载体 DNA 分子将发生自身环化连接。（一）5'-端去磷酸化反应通常只对载体 DNA 分子进行 5'-端去磷酸化反应就基本可以避免自身环化连接。【实验试剂与器材】1. 小牛肠磷酸酶 (Calf intestine phosphatase ,CIP)2. 10×CIP 缓冲液【实验方法与步骤】1. 酶切 DNA 反应，在 75 ℃ 加热 15 min 灭活
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