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- XYbscience
- 中国/美国
- XY1839
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 保质期：
三年
- 英文名：
pEGM-3ZF(+)
- 库存：
60
- 供应商：
信裕生物
- 规格：
5ug质粒
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌克隆载体 |
|---|---|
| 克隆方法: | 多克隆位点，限制性内切酶 |
| 载体大小: | 3197 bp (查看载体序列) |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
订购信息
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
|---|---|---|---|
| XY1839 | pEGM-3ZF(+) | 5ug质粒 |
¥1000.00 |
质粒图谱
载体描述
The pGEM ® -3Zf(+) Vector is a derivative of the pGEM ® -3Z Vector and contains the origin of replication of the filamentous phage f1. The plasmid serves as a standard cloning vector, as a template for in vitro transcription and as a template for the production of circular ssDNA.
The pGEM ® -3Zf(+) Vector contains SP6 and T7 RNA polymerase promoters flanking a multiple cloning region within the α -peptide coding region of β -galactosidase (1). Insertional inactivation of the α -peptide allows recombinant clones to be directly identified by color screening on indicator plates. The multiple cloning region is unique and includes restriction sites for EcoRI, SacI, KpnI, AvaI, SmaI, BamHI, XbaI, SalI, AccI, HincII, PstI, SphI and HindIII.
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文献和实验冲液后，PCR扩增TFPI基因。 (二)TFPI基因的体外重组与测序 以EcoRI和BamHI双酶切扩增出的TFPI基因和pGEM-3Zf(-)质粒，在T4DNA连接酶的作用下，将TFPI基因与pGEM-3Zf(-)质粒重组获得pGEM-3Zf(-)-TFPI克隆质粒，转化大肠杆菌DH5α，涂LBA平板，挑阳性克隆。 为了保证所获基因的准确性，必须对其进行DNA序列测定。现有许多生物技术公司能够提供测序服务，其快捷、方便，且价格合理，为大多数实验室所采用。 (三)表达载体
把亮氨酸自养型载体转入亮氨酸异养型菌株即可在无亮氨酸的培养基中生长。 5.蓝白筛选 蓝白筛选是通过插入失活lacZ基因，破坏重组子与宿主之间的ɑ-互补作用来鉴别重组子与非重组子的筛选方法，是携带lacZ基因的许多载体的筛选优势。这些载体包括M13噬菌体，pUC质粒系列，pEGM质粒系列等。它们的共同特点是载体上携带一段细菌lacZ基因的α肽编码序列，其编码产物为β-半乳糖苷酶的α肽。当无外源DNA插入时，质粒表达α肽。突变
片段。 3.目的片段的克隆 纯化的片段连接到克隆载体pGEM-Tvector，转化导入宿主菌E.coliDH5α，通过蓝白斑筛选，PCR扩增鉴定后测序，获得的含所需要的目的片段的质粒。 （1）pGEM®-TEasy载体系统 I.描述 pGEM®-TEasy载体系统可用于PCR产物的克隆。这种载体是通过EcoRⅤ酶切pGEM®-5Zf(+)和pGEM®-TEasy载体，并在3’末端加入胸腺嘧啶构建的。插入位点3’-T突出端可提高PCR产物的连接效率，因为3’-T突出端可以防止载体的自身环化，并且为
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