| 出品公司: | ZYbscience |
|---|---|
| 载体名称: | pcDNA3.1-EGFP, pcDNA3.1(+)EGFP |
| 质粒类型: | 哺乳动物细胞表达载体 |
| 启动子: | CMV |
| 表达水平: | 高 |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 6119 bp |
| 5' 测序引物: | pcDNA3.1-F:CTAGAGAACCCACTGCTTAC |
| 3' 测序引物: | pcDNA3.1-R (BGH-R):TAGAAGGCACAGTCGAGG |
| 载体标签: | EGFP |
| 载体抗性: | Ampicillin |
| 筛选标记: | Neomycin/G418 |
| 备注: |
EGFP were inserted into pcDNA3.1(+) by BamHI and Not I.
|
| 产品目录号: | -- |
| 稳定性: | 瞬表达 Transient |
| 组成型: | 组成型 Constitutive |
| 病毒/非病毒: | 非病毒 |
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃低温保存
- 保质期:
三年
- 英文名:
pcDNA3.1-EGFP
- 库存:
20
- 供应商:
泽叶生物
载体基本信息
载体质粒图谱和多克隆位点信息
载体简介
载体序列
LOCUS pcDNA3.1(+)-EGFP 6119 bp DNA circular SYN 21-JUN-2012 SOURCE ORGANISM COMMENT This file is created by Vector NTI http://www.biofeng.com/ COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com| FEATURES Location/Qualifiers CDS complement(5123..5983) /invitrogen="1020000" /vntifkey="4" /label=Amp(R) polyA_site 1719..1943 /invitrogen="1870000" /vntifkey="26" /label=BGH\pA primer complement(1713..1730) /invitrogen="1910000" /vntifkey="27" /label=BGH\reverse\primer promoter complement(5984..6082) /invitrogen="2330000" /vntifkey="30" /label=bla\promoter primer 769..789 /invitrogen="1930000" /vntifkey="27" /label=CMV\forward\primer promoter 232..819 /invitrogen="2180000" /vntifkey="29" /label=CMV\promoter rep_origin 1989..2417 /invitrogen="2500000" /vntifkey="33" /label=f1\origin CDS 2827..3621 /invitrogen="1260000" /vntifkey="4" /label=Neo(R) rep_origin complement(4308..4978) /invitrogen="2540000" /vntifkey="33" /label=pUC\origin promoter 2422..2791 /invitrogen="2290000" /vntifkey="29" 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tcaatgacgg taaatggccc gcctggcatt 541 atgcccagta catgacctta tgggactttc ctacttggca gtacatctac gtattagtca 601 tcgctattac catggtgatg cggttttggc agtacatcaa tgggcgtgga tagcggtttg 661 actcacgggg atttccaagt ctccacccca ttgacgtcaa tgggagtttg ttttggcacc 721 aaaatcaacg ggactttcca aaatgtcgta acaactccgc cccattgacg caaatgggcg 781 gtaggcgtgt acggtgggag gtctatataa gcagagctct ctggctaact agagaaccca 841 ctgcttactg gcttatcgaa attaatacga ctcactatag ggagacccaa gctggctagc 901 gtttaaactt aagcttggta ccgagctcgg atccaccggt cgccaccatg gtgagcaagg 961 gcgaggagct gttcaccggg gtggtgccca tcctggtcga gctggacggc gacgtaaacg 1021 gccacaagtt cagcgtgtcc ggcgagggcg agggcgatgc cacctacggc aagctgaccc 1081 tgaagttcat ctgcaccacc ggcaagctgc ccgtgccctg gcccaccctc gtgaccaccc 1141 tgacctacgg cgtgcagtgc ttcagccgct accccgacca catgaagcag cacgacttct 1201 tcaagtccgc catgcccgaa ggctacgtcc aggagcgcac catcttcttc aaggacgacg 1261 gcaactacaa gacccgcgcc gaggtgaagt tcgagggcga caccctggtg aaccgcatcg 1321 agctgaaggg catcgacttc aaggaggacg gcaacatcct ggggcacaag ctggagtaca 1381 actacaacag ccacaacgtc tatatcatgg ccgacaagca gaagaacggc atcaaggtga 1441 acttcaagat ccgccacaac atcgaggacg gcagcgtgca gctcgccgac cactaccagc 1501 agaacacccc catcggcgac ggccccgtgc tgctgcccga caaccactac ctgagcaccc 1561 agtccgccct gagcaaagac cccaacgaga agcgcgatca catggtcctg ctggagttcg 1621 tgaccgccgc cgggatcact ctcggcatgg acgagctgta caagtaaagc ggccgctcga 1681 gtctagaggg cccgtttaaa cccgctgatc agcctcgact gtgccttcta gttgccagcc 1741 atctgttgtt tgcccctccc ccgtgccttc cttgaccctg gaaggtgcca ctcccactgt 1801 cctttcctaa taaaatgagg aaattgcatc gcattgtctg agtaggtgtc attctattct 1861 ggggggtggg gtggggcagg acagcaaggg ggaggattgg gaagacaata gcaggcatgc 1921 tggggatgcg gtgggctcta tggcttctga ggcggaaaga accagctggg gctctagggg 1981 gtatccccac gcgccctgta gcggcgcatt aagcgcggcg ggtgtggtgg ttacgcgcag 2041 cgtgaccgct acacttgcca gcgccctagc gcccgctcct ttcgctttct tcccttcctt 2101 tctcgccacg ttcgccggct ttccccgtca agctctaaat cgggggctcc ctttagggtt 2161 ccgatttagt gctttacggc acctcgaccc caaaaaactt gattagggtg atggttcacg 2221 tagtgggcca tcgccctgat agacggtttt tcgccctttg acgttggagt ccacgttctt 2281 taatagtgga ctcttgttcc aaactggaac aacactcaac cctatctcgg tctattcttt 2341 tgatttataa gggattttgc cgatttcggc ctattggtta aaaaatgagc tgatttaaca 2401 aaaatttaac gcgaattaat tctgtggaat gtgtgtcagt tagggtgtgg aaagtcccca 2461 ggctccccag caggcagaag tatgcaaagc atgcatctca attagtcagc aaccaggtgt 2521 ggaaagtccc caggctcccc agcaggcaga agtatgcaaa gcatgcatct caattagtca 2581 gcaaccatag tcccgcccct aactccgccc atcccgcccc taactccgcc cagttccgcc 2641 cattctccgc cccatggctg actaattttt tttatttatg cagaggccga ggccgcctct 2701 gcctctgagc tattccagaa gtagtgagga ggcttttttg gaggcctagg cttttgcaaa 2761 aagctcccgg gagcttgtat atccattttc ggatctgatc aagagacagg atgaggatcg 2821 tttcgcatga ttgaacaaga tggattgcac gcaggttctc cggccgcttg ggtggagagg 2881 ctattcggct atgactgggc acaacagaca atcggctgct ctgatgccgc cgtgttccgg 2941 ctgtcagcgc aggggcgccc ggttcttttt gtcaagaccg acctgtccgg tgccctgaat 3001 gaactgcagg acgaggcagc gcggctatcg tggctggcca 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文献和实验-MEM、DMEM培养基和M-MLV逆转录酶;小牛血清;G418;DIG High PrimeDNA Labeling and Detection Starter Kit I1。 质粒 pGL3-promoter;含EBVR的质粒p220.2。 重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBVR的构建 采用StuI和XbaI消化p220.2,获得长4.7 kb的EBVR,包括EBV核抗原1(EBNA1)和OriP,克隆至pGL3-promotor的SV40启动子下游Hind Ill
zhangyuxianggx 各位大侠好!现有pcDNA3-mCherry和pGEM-hgene两个东西在滤纸上,老师就说让构建载体,具体是什么意思啊?我理解的是一个真核表达载体和构建好的pGEM质粒,但是不知下一步该怎么做?恳请各位好心的大侠指点一二。 shylook 直接插入cDNA吧 zhangyuxianggx 那个pGEM就是已经插入了DNA的载体。请问这两个东西溶下来以后
切下来重新构建,希望有经验的大侠能够指点,可以选择些什么样的质粒呀? pcDNA 3.1 就可以了。 最好是带有GFP标记的非病毒质粒, 有的pcDNA3.1有带GFP标记的。 还有个问题请教就是,病毒载体是不是不需要类似于G418筛选的标记呀? 看你实验目的,一般来说,G418是耐药筛选转染后的细胞株,将没转染成功的细胞用G418杀死,但如果只是做基因治疗的话,基因的转染成果与否,感染细胞的效果可以用流式细胞或荧光显微镜看GFP的表达
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