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- 2025年07月14日
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Luciferase报告基因系统是以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(fireflyluciferase)活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)，并可通过荧光测定仪设备对luciferin氧化过程中释放的生物荧光进行检测，常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。
荧光酶报告基因检测实验流程图：
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文献和实验也可以在体内分析。具体的细胞转染及所需的后续步骤因细胞种类及转染方法等各不相同。我们实验室比较擅长的是基于报告基因检测的药物筛选方法，具体来说就是利用荧光素酶这一报告基因建立的多种药筛模型。各种报告基因的比较报告基因优点缺点氯霉素乙酰转移酶基因（CAT）在哺乳动物中没有内源性活性；可用自动化的ELISA方法检测线性范围窄；灵敏度相对较低；需要使用放射性同位素 β-半乳糖苷酶基因（β-Gal）蛋白稳定；生物或化学发光检测灵敏；不需要使用同位素在哺乳动物细胞中有内源性活性人生
【求助】请教一个关于双荧光素酶报告基因检测系统中共转染两种报告基因质粒的比例的问题？
lsdcfhyj 用双荧光素酶报告基因检测系统进行报告基因检测时需要共转染两种荧光素酶报告基因质粒，但是我不知道两种质粒间的比例是多少，有哪位前辈做过这方面实验的，请帮我指点一下，谢谢了 xxshc 这个比例没有特别的规定。我用的pRL－TK（海蜃素荧光素酶）的荧光值要高一些，我转20ng/孔（24孔板），作为内参.pGL3（萤火虫荧光素酶）的荧光值低一些，我转0.4ug/孔（24孔板）然后0.4ug的调整质粒。这样的话，萤火
【求助】请教荧光素酶报告基因检测NF-KB转录活性需要哪些试剂？
阿兰梦 之前没有做过，只是根据文献的简单描述依葫芦画瓢，但是毕竟是好几千的试剂，生怕弄错了 临床医生一下子做科研，确实很多地方不懂，很艰难 目的是想用双荧光素酶报告基因的方法检测药物内皮细胞的NF-KB的转录活性影响，需要买pNF-kB-Luc 报告质粒，碧云天有；然后需要双荧光素酶报告基因检测系统，promega有；另外还需要一个内参，文献是β-半乳糖苷酶 问题是： 1、不知道买哪一个对： http://www
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