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上海瑶韵生物
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文献和实验The ribonuclease protection assay (RPA)
, 5X transcription buffer, and RPA template set to RT. For each probe synthesis, add the following in order to a 1.5 ml Eppendorf tube: 1 µl RNasin® 1 µl GACU pool 2 µl DTT 4 µl 5X transcription buffer 1 µl RPA Template Set 10 µl [a-32
灯下切取特异的扩增谱带 2 将挖取的琼脂糖凝胶置于1.5ml Eppendorf管中,加50µl TE,用枪头捣碎凝胶后于45℃水浴30min。 3 离心5分钟后,取上清夜继续进行PCR,反应条件同第一次PCR。 体系各成分 用 量(μL
,在这里做统一说明:为了达到预期效果,形成湍流是关键。所谓吸打,不仅要吸入液体,在吸入液体之后还要吸入适量气体,所以移液器的量程一定要大于待吸入液体的量,在吸入液体或气体时,要缓慢释放移液器按钮,确保充分混匀。在吸入气体时,可以看见有大量气泡产生,让树脂随溶液湍流与样品充分、快速混合。如「 500 µL 甲醇吸打一次」的意思是:A. 将 1 mL 移液枪刻度调至 1 mL,连接 1 mL MicroSep® DPX tips;B. 将移液器控制按钮按至 1 档,将枪头插入至液面下(要保证容器内的液体
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