特殊石蜡切片甘油三脂脂酶法格莫瑞（Gomori）间接染色试剂

甘油三酯（Triglyceride；TG）是脂类物质（包括脂肪酸及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂，以及其它固醇类物质，例如胆固醇）的一种，由3分子长链脂肪酸和1分子甘油脂化形成的脂肪分子。甘油三酯是人体内含量多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成，在脂肪组织中贮存。甘油三酯水平的异常，与动脉粥样硬化等疾病有关。通过胰酯酶（pancreatic lipase）水解甘油三酯，释放出脂肪酸，然后运用格莫瑞（Gomori）钙-铅-硫酸盐方法，即与钙离子反应后，脂肪酸成为不溶性钙皂（calcium soap），然后与铅离子交换，形成铅皂（lead soap），终转换成硫酸铅，特异性进行中性甘油三酯，而不是脂蛋白、磷脂、胆固醇等的组织化学染色，而避免油性红O（Oil Red O）的非特异性，且全脂质染色的缺陷。由于组织切片在包埋前处理和染色前脱蜡的过程中，有机溶剂容易破坏和减少组织中的脂质成分，因此防护和固定组织中的脂质成分是该染色的关键。

产品内容

HEPENGBIO清理液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO固着液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO乳化液（Reagent C） 毫升
HEPENGBIO净化液（Reagent D） 毫升
HEPENGBIO氧化液（Reagent E） 毫升
HEPENGBIO修复液（Reagent F） 毫升
HEPENGBIO去石蜡液（Reagent G） 毫升
HEPENGBIO补水液A（Reagent H） 毫升
HEPENGBIO补水液B（Reagent I） 毫升
HEPENGBIO补水液C（Reagent J） 毫升
HEPENGBIO补水液D（Reagent K） 毫升
HEPENGBIO皂化液（Reagent L） 毫升
HEPENGBIO水解液（Reagent M） 毫升
HEPENGBIO置换液（Reagent N） 毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent O） 毫升
产品说明书 1份


保存方式

保存HEPENGBIO水解液（Reagent M）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月

用户自备

苏木素复染试剂盒（HEPENGBIO80067）：用于常规染色后复染
水相封片液（HEPENGBIO12146）：用于染色后封片处理
无离子水：用于清洗样品
无菌手术刀和镊子：用于组织块处理
恒温培养箱：用于组织处理孵育
6孔细胞培养板：用于组织处理的容器
小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器
切片机：用于组织切片
明胶化载玻片和盖玻片：用于切片后铺片
中性树脂：用于切片封片
光学显微镜：用于切片染色后观察分析

实验步骤

• 样本固着处理

1. 用无菌手术刀将新鲜组织切成2毫米厚的组织块
2. 即刻用无菌镊子夹起组织块，小心放进xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent A）中浸泡3秒2次
3. 转移到xx毫升HEPENGBIO固着液（Reagent B）里
4. 室温下浸泡孵育24小时，避免光照
5. 即刻用无菌镊子夹起组织块，小心放进上述xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent A）中浸泡1小时
6. 小心转移到xx毫升HEPENGBIO乳化液（Reagent C）里（注意：如果组织已经使用福尔马林固定的，则从这一步骤开始）
7. 在56℃恒温培养箱里浸泡孵育48小时，避免光照
8. 准备1个6孔细胞培养板，分别加入xx毫升HEPENGBIO净化液（Reagent D）到3个孔里
9. 再分别加入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent A）到另外3个孔里
10. 小心转移组织块到上述6孔板的第一个孔里
11. 室温下孵育1小时
12. 转移组织块到上述6孔板的第二个孔里
13. 室温下孵育1小时
14. 依次直到第六个孔
15. 小心转移组织块到新鲜的xx毫升HEPENGBIO氧化液（Reagent E）里
16. 在4℃冰箱里浸泡孵育24小时，避免光照
17. 小心转移到20毫升用户自备的无离子水里
18. 室温下孵育24小时
19. 小心转移到xx毫升HEPENGBIO修复液（Reagent F）里
20. 室温下浸泡孵育24小时，避免光照
21. 小心转移到20毫升用户自备的无离子水里
22. 室温下孵育8小时（注意：可以孵育24小时）
23. 用绵纸吸干组织快
24. 即刻进行石蜡包埋
25. 取出组织块，进行缓慢石蜡切片，为10微米厚，并铺片在明胶化切片上

• 去石蜡处理

1. 取出10片待测的10微米厚的石蜡包埋的组织切片
2. 放进80℃烘箱，孵育30分钟
3. 室温下静置15分钟
4. 按下表依次放进小染色缸里孵育

染色缸	孵育时间
xx毫升HEPENGBIO去石蜡液（Reagent G）	15分钟
xx毫升HEPENGBIO去石蜡液（Reagent G）