- ￥2200
- 赫澎生物
- 上海
- HPBIO-JM3158
- 2025年11月16日
企业认证
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
干燥密封保存
- 库存：
现货
- 供应商：
赫澎（上海）生物
- 规格：
5次
产品内容
HEPENGBIO稀释液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO还原液（Reagent B） 毫升
HEPENGBIO平衡液（Reagent C） 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里， 避免光照，有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管：用于样品保存的容器
恒温摇床：用于反应孵育
实验步骤
方法一：还原复性
- 准备好可溶性纯化变性蛋白样品
- 移取适量的蛋白样品到1.5毫升离心管
- 加入适量的HEPENGBIO稀释液（Reagent A）调整蛋白浓度到10毫克/毫升
- 移取100微升蛋白样品到新的1.5毫升离心管
- 加入xx微升HEPENGBIO还原液（Reagent B）
- 放进20℃恒温摇床孵育4小时，速度为200RPM
- （选择步骤）移取10微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
- 即刻放进－70℃冰箱里保存
方法二：平衡复性
1．准备好可溶性纯化变性蛋白样品
2．移取适量的蛋白样品到1.5毫升离心管
- 加入适量的HEPENGBIO稀释液（Reagent A）调整蛋白浓度到5毫克/毫升
- 移取5微升蛋白样品到新的1.5毫升离心管
- 加入xx微升HEPENGBIO平衡液（Reagent C）
- 放进28℃恒温摇床孵育2小时，速度为200RPM
- （选择步骤）移取10微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、HPLC、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
- 即刻放进－70℃冰箱里保存
注意事项
- 本产品为5次操作（还原和平衡各5次）
- 操作时须戴手套
- 本产品的复性效率达15至30％
- 建议与本公司系列包涵体蛋白溶解试剂盒配套使用
- 由于样品的特异性，用户可以优化温度、孵育时间、蛋白浓度，以获得大复性效率
- 如果复性效率过低，建议使用HEPENGBIO可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂盒－HEPENGBIO30044.5
- 如果获得满意的复性效果，用户可以按比例扩大复性容量
- 本公司提供系列包涵体蛋白处理试剂产品
质量标准
- 本产品经鉴定性能稳定
- 本产品经鉴定无蛋白酶污染
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- 内容
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文献和实验概要 对于基因工程技术构建的重组蛋白，通常分为可溶性重组蛋白和不溶性重组蛋白，可溶性的重组蛋白一般常常存在于细胞质内、细胞分泌到培养基、分泌到周质间隙中等。不可溶性的蛋白主要是由于表达系统的高效表达，在细胞内形成了包涵体。E.coli是应用最为广泛的重组蛋白质表达系统，但是表达的外源性蛋白多以包涵体的形式存在，为了重新获得生物活性，需要对包涵体蛋白质进行体外变复性操作。 蛋白质复性模型 根据对蛋白质折叠过程的研究，目前科学家已提出多种蛋白质复性模型，折叠漏斗模型是目前被广泛认可
浓缩后，可用：机械破碎、超声破碎：单纯超声破碎，在小规模下且菌量较少的情况下效果较好，由于能量传递和局部产热等原因，很难用于大体积细胞悬液的破碎，这样部分未破碎细胞与包涵体混在一起，给后期纯化带来困难。因此，在较大规模纯化时先用溶菌酶破碎细菌的细胞膜，再结合超声破碎方法，可显著提高包涵体的纯度和回收率。以及化学方法破碎使细菌裂解,然后以5000-20000g 15min离心，可使大多数包涵体沉淀，与可溶性蛋白分离。 1.3.2洗涤：为了除去包涵体上粘附的杂质，如膜蛋白或核酸，应用洗涤液洗涤包涵体
液，经离心浓缩后，可用：机械破碎、超声破碎：单纯超声破碎，在小规模下且菌量较少的情况下效果较好，由于能量传递和局部产热等原因，很难用于大体积细胞悬液的破碎，这样部分未破碎细胞与包涵体混在一起，给后期纯化带来困难。因此，在较大规模纯化时先用溶菌酶破碎细菌的细胞膜，再结合超声破碎方法，可显著提高包涵体的纯度和回收率。以及化学方法破碎使细菌裂解 , 然后以 5000-20000g 15min 离心，可使大多数包涵体沉淀，与可溶性蛋白分离。 1.3.2 洗涤：为了除去包涵体上粘附的杂质
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