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发酵产物蛋白酶(PROTEASE)活性光度法定量检测试剂盒

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  • ¥3300
  • 赫澎生物
  • 上海
  • HPBIO-JM5759
  • 2025年11月16日
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      干燥密封保存

    • 供应商

      赫澎(上海)生物

    • 规格

      20次

    蛋白酶(protease)又称为肽酶(peptidase)或蛋白质酶(proteinase),是一类蛋白水解的酶,属于水解酶(hydrolase)家属中一员,存在于所有生物体内,共有560种不同的蛋白酶,通过易切断(sciccile)肽键的水解,进行蛋白质的分解代谢,参与细胞繁殖分化、免疫反应、神经外展、血管、血液凝结、补体系统、凋亡等一系列生理活动,同时水解食物蛋白、活化蛋白功能、产生信号分子、破坏蛋白结构一旦失调,与感染性疾病、心血管疾病、退行性疾病、癌症等有关。蛋白酶基本分成6类,包括丝氨酸(serine例如胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、凝血酶(thrombin)、纤溶酶(plasmin)、弹力蛋白酶(elastase)、枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin等;苏氨酸(threonine)、半胱氨酸(cysteine例如胶原蛋白酶(collagenase)、蛋白酶Kproteinase K)、木瓜蛋白酶(papain胃蛋白酶(pepsin)、菠萝蛋白酶(bromelin)、无花果蛋白酶(ficin)、组织蛋白酶(cathepsin)等;谷氨酸(glutamate)、天冬氨酸(aspartate)、金属(metalloprotease)蛋白酶等;也可以分成酸性(例嗜热菌蛋白酶Thermolysin、中性和碱性蛋白酶等;还可以分成内切肽酶,例如胰蛋白酶(trypsin),和外切肽酶,例如羧基肽酶Acarboxypeptidase)。蛋白酶抑制剂成为抗病毒、凝血病、高血压的治疗药物。 基于底物酪蛋白(casein),在蛋白酶的催化水解下,释放出游离酪氨酸(tyrosine),继而与福林-酚试剂(Folin & Ciocalteus phenol)反应产生色产物,通过其吸收峰值的变化660nm波长),来定量分析蛋白活性。反应系统

    产品内容

    HEPENGBIO缓冲液(Reagent A 毫升
    HEPENGBIO底物液(Reagent B 毫升
    HEPENGBIO终止液(Reagent C 毫升
    HEPENGBIO中和液(Reagent D 毫升
    HEPENGBIO显色液(Reagent E 毫升
    HEPENGBIO补充液(Reagent F
    HEPENGBIO标准液(Reagent G
    产品说明书 1份

    保存方式

    保存在4冰箱里;HEPENGBIO终止液(Reagent C具有腐蚀性,注意操作安全;HEPENGBIO显色液(Reagent E),避免光照,有效保证6

    用户自备

    15毫升锥形离心管:用于样品操作的容器
    1.5毫升离心管:用于标准品操作的容器
    尼龙网(nylon mesh):用于去除残渣
    4℃(微型)台式离心机:用于样品处理
    培养箱:用于反应物孵育
    比色皿:用于比色测定的容器
    分光光度仪:用于比色分析

    实验步骤

    一、样品准备
    1. 移取5毫升新鲜的发酵样品到15毫升锥形离心管
    2. 放进4台式离心机离心10分钟,速度为1000g
    3. 分别移取上清液到预冷的1.5毫升离心管
    4. 移取10微升进行蛋白定量检测(注意:建议使用HEPENGBIO Bradford蛋白质浓度定量试剂盒-HEPENGBIO30030.1
    5. 即刻放进-70℃保存或置于冰槽里继续后续操作

    二、测定准备
    1. 从-70℃取出待测样品,置于冰槽里
    2. 设定好分光光度仪(温度为37℃):波长为660nm,并置零
    3. HEPENGBIO缓冲液(Reagent A室温下均衡温度
      • 标准样品测定
    1. 准备好5个2.2毫升离心管,标记为15号管
    2. 分别加入xx毫升HEPENGBIO缓冲液(Reagent A2至5号管
    3. 移取xx毫升HEPENGBIO标准液(Reagent G到1号管,混匀
    4. 小心移取xx毫升1号管的HEPENGBIO标准液(Reagent G到2号管,混匀
    5. 小心移取xx毫升2号管稀释的HEPENGBIO标准液(Reagent G到3号管,混匀
    6. 小心移取xx毫升3号管稀释的HEPENGBIO标准液(Reagent G到4号管,混匀
    7. 将1至5号管放进冰槽里备用;标准管浓度见下表
    管号 HEPENGBIO缓冲液(Reagent A HEPENGBIO标准液(Reagent G 标准酪氨酸浓度
    1 ——

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    相关实验
    • Caspase活性检测系列(分光光度法)检测原理及操作指南

      一、检测原理 Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;在细胞发生凋亡阶段,Caspase被激活,活化的Caspase可裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。 Caspase分光光度法检测试剂盒的原理是将Caspase序列特异性的多肽偶联至黄色发光基团pNA (p-nitroaniline)。当该底物被活化的Caspase剪切后,黄色

    • 酶类生化试剂盒注意事项

      计算出底物消耗速度或产物生成速度,将速度换算为μmol/min即是以国际单位表示的酶活性。 例如: 假设某一样品种的酶活性记为X U/L,取样品量VS(mL)与底物缓冲液Vr(mL)孵育,t min后加入终止液Ve(mL),检测到的净吸光度增加为A,该产物的摩尔消光系数为ε(一般可通过带标准求得),比色皿光径为 b cm。③ 连续监测计算 酶与底物在特定条件下孵育,每隔一定时间(2-60 s)连续测定酶促反应过程中某一底物或产物的特征信号的变化,从而计算出每分钟的信号变化速率。连续监测

    • 【求助】求助caspase的检测方法

      。 2. western blot可以半定量 3. caspase的活性有试剂盒可以检测 yqsqzr 谢谢了,是不是一般caspase的检测都是用western blot? western步骤多,比较繁琐,是否有可能检测不到结果? zgxsea caspase蛋白酶的活性检测方法,个人做过和了解的有这样几种: 1. 荧光光度计/分光光度,比较简单,只要有荧光或普通酶标仪即可,操作过程类似与ELISA

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