细胞去甲基化处理试剂盒

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在基因的启动子区域（promotor region）通常存在一些富含重复双核苷酸“CG”的区域，称为“CpG岛”（CpG island）。在人类基因组内，存在有近3万个CpG岛。这些CpG岛不仅是基因的一种标志，而且还参与基因表达的调控和影响染色质的结构，更是DNA甲基化的唯一位置。5-氮杂-2-脱氧胞苷（5-Aza-2-deoxycytidine；5-aza-cdR或5-aza-dC）是一种脱甲基的氨基乙醇，又称DECITABINE。作用于强力抑制DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase）。其分子式为C8H12N4O4，分子量为228.2。通过去甲基化处理，染色质结构模型重新改变，使转录因子能够结合在启动子上，形成转录复合物，启动基因表达。

产品内容

HEPENGBIO处理液（Reagent A） 毫升
HEPENGBIO清理液（Reagent B） 毫升
产品说明书 1份

保存方式

保存HEPENGBIO处理液（Reagent A）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；保存HEPENGBIO清理液（Reagent B）在4℃冰箱里； 有效保证6月

用户自备

25cm²细胞培养瓶：用于培养细胞的容器
HEPENGBIO DMEM完全细胞培养基（HEPENGBIO12052）：用于细胞培养的营养基
血细胞计数器：用于细胞计量

实验步骤

1. 准备1瓶25cm²细胞培养瓶
2. 接种用户需化学去甲基化的细胞（1 X 10⁵细胞总量）
3. 放进37℃细胞培养箱孵育24小时，或直到细胞生长密度达10％
4. 小心抽去细胞培养液
5. 小心加入3毫升用户自备的完全细胞培养液
6. 小心加入xx微升HEPENGBIO 处理液（Reagent A）
7. 轻轻摇匀后，放进37℃细胞培养箱孵育24小时
8. 小心抽去含有HEPENGBIO 处理液（Reagent A）的细胞培养液
9. 重复实验步骤5至8二次
10. 小心加入xx毫升HEPENGBIO清理液（Reagent B），清洗生长中的细胞表面
11. 小心抽去 HEPENGBIO清理液（Reagent B）
12. 继续后续操作

注意事项

1. 本产品为20次操作
2. 操作时，须戴手套
3. 操作时，须严格无菌操作
4. 用户可以根据需求，使用不同的培养皿或培养瓶，相应调整试剂用量
5. HEPENGBIO处理液（Reagent A）的使用比例为1：100，即1毫升培养液加入10微升HEPENGBIO处理液（Reagent A）
6. 本公司提供系列甲基化分析试剂产品

质量标准

1. 本产品经鉴定性能稳定

本产品经鉴定去甲基化作用显著