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文献和实验脂酰CoA(β-hydroxyacyl CoA)。 (3)再脱氢: β-羟脂酰CoA在β-羟脂酰CoA脱氢酶(L-β-hydroxyacyl CoA dehydrogenase)催化下,脱去β碳上的2个氢原子生成β-酮脂酰CoA,脱下的氢由该酶的辅酶NAD+接受,生成NADH和H+。后者经电子传递链氧化生成水及2.5分子ATP。 (4)硫解: β-酮脂酰CoA在β-酮脂酰CoA硫解酶(β-ketoacyl CoA thiolase)催化下,加一分子CoA-SH,使碳链断裂,产生乙酰CoA
碳原子上各脱去一个氢原子生成具有反式双键的α、β-烯脂肪酰辅酶A。 第二步加水(hydration)反应由烯酰CoA水合酶催化,生成具有L-构型的β-羟脂酰CoA。 第三步脱氢反应是在β-羟脂肪酰CoA脱饴酶(辅酶为NAD+)催化下,β-羟脂肪酰CoA脱氢生成β酮脂酰CoA。 第四步硫解(thiolysis)反应由β-酮硫解酶催化,β-酮酯酰CoA在α和β碳原子之间断链,加上一分子辅酶A生成乙酰CoA和一个少两个碳原子的脂酰CoA。
的必需辅酶,与可溶性四唑染料反应生成可通过分光光度法 检测的产物。比色法是动力学研究的理想选择,支持连续检测。 荧光法 - CoA-SH 与显色剂和探针反应生成可通过荧光检测的产物。 表征组蛋白去乙酰化酶活性 根据功能和 DNA 序列相似性,HDAC 蛋白可分为四大类(I 类、IIA 类、IIB 类、III 类、IV 类)。 I 类、IIA 类和 IIB 类被视为“经典”HDAC,其活性被曲古抑菌素 A (TSA) 抑制,而 III 类是 NAD + 依赖
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