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赫澎(上海)生物
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文献和实验光标记物。 (4)封闭血清与二抗来源动物一致,我用的是10%的正常donkey血清。 (5)其余步骤同一般免疫 荧光单标操作。 2、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同? 参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。 3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光,二抗为FITC标记,想请教各位大侠: (1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
,让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。4、问:做间接法免疫荧光染色,如何设置对照?参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性染色。(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化,这个对照必须有,目的是看自发荧光,脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清,以PBS冲洗后,在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体,应呈阴性反应。5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色,结果用激光
原位杂交的教程及问题分析,可以帮助分析杂交试验失败的原因. 目录 第一节 原位核酸分子杂交技术的发展? 第二节 原位杂交技术的基本方法? (一)固定? (二)玻片和组织切片的处理? (三)杂交? (四)杂交后处理? (五)显示? (六)对照实验和结果的判断? 第三节 原位DNA和DNA分子杂交方法? (一)地高辛(Dig)标记DNA探针在石蜡切片检测病毒DNA的方法? (二)生物素标记HPV-DNA探针在石蜡切片上检测HPV-DNA的方法? 第四节 RNA原位核酸
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