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lncRNA测序

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      卓灏医药

    长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)是指长度在200~100000 nt之间不具有蛋白编码功能的RNA分子。它们存在带polyA尾和不带polyA尾两种形式,具有跨物种的低保守性,组织特异性表达和丰度低等特点。lncRNA的种类远远超过编码RNA,保守估计哺乳动物基因组序列中4%~9%的序列产生lncRNA转录本,而相应的蛋白编码RNA的比例仅是1%~5%。目前研究提示lncRNA的功能机制主要包括参与转录调控、转录后调控、蛋白质运输和mRNA降解。lncRNA已经成为非编码RNA研究领域的一个热点,借助高通量测序,研究人员能够快速获得与疾病或者特定生物学过程相关的lncRNA并进行深入研究。

    生物信息学分析

    测序数据质量评估(QC);
    参考基因组比对分析
    转录本组装和新转录本预测
    新长链非编码RNA预测
    已知转录本和新长链非编码转录本差异分析
    长链非编码RNA靶基因预测
    差异基因功能分析(GO注释、KEGG注释)
    聚类分析
    进阶分析等

    样品要求

    样品类型:细胞、新鲜组织或RNA样品。
    样品的量:细胞样品请提供至少1×107个细胞,组织样品请提供至少300mg的组织块或切片,RNA样品请提供2 μg以上的总RNA。
    样品质量:RNA无明显降解,提取的总RNA OD260/280值在1.8~2.2之间,浓度 ≥ 500 ng/μl,28S:18S ≥ 1.5,RIN ≥ 7。
    样品保存:细胞样品或新鲜组织块(切成~50mg的小块)可用TRIZOL或RNA保护剂处理或液氮冻存后,-80℃保存。RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中,-80℃保存。样品保存期间避免反复冻融。
    样品运输:样品置于1.5 ml管中,封口膜封好,干冰运输。

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    相关实验
    • 读一文掌握LncRNA研究套路

      质的修饰水平 5. 与mRNA配对结合,影响翻译,剪切,mRNA的稳定性(类似miRNA功能) 作用 1. Co-location,也称cis作用 2. Co-expression, 也称trans作用 • LncRNA研究基本技术 1. 芯片或测序寻找新的lncRNA 2. 生物信息学分析 3. lncRNA定位 4. 过表达或敲减功能验证 5. lncRNA互作机制研究 • LncRNA的生物信息学分析 1. 基本处理 Ø

    • lncRNA研究策略与技术

      研究背景: 长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)是一类不编码蛋白的RNA分子,长度在200 bp以上,起初被认为是RNA聚合酶II转录的副产物,不具有生物学功能;近期的研究表明lncRNA具有保守的二级结构,可以与蛋白、DNA和RNA相互作用,参与多种生物学过程的调控,尤其在肿瘤当中发挥了重要的调控角色,如染色质修饰、转录激活和抑制、转录后调解以及作为miRNA的诱导分子干扰基因的表达等。随着高通量测序技术的发展,越来越多的lncRNA被注释

    • 大家好,我是一条佛系的 lncRNA

      了作为一条 RNA 的使命,我这颗静如止水的心也按捺不住了,我也渴望被发掘,我也渴望被研究,我也渴望完成我的使命,让大家深入的了解我。终于,机会来了,一位年轻的科研工作者从众多的 RNA-SEQ 的数据中发现了我们,进行不同时期的实时荧光量 PCR 的检测之后,他决定对我这条期特异性表达的非编码 RNA 进行研究。我终于守得云开见月明,有了被研究的价值。由于我的长度大于 200bp,所以我的主人称我为长链非编码 RNA,简写为 lncRNA。我很喜欢我的名字。然而研究的过程并非一帆风顺。我的主人首先需要

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