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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
LIC Cloning Kit for PCR
- 库存:
824
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1ug
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销售PCR专用LIC克隆套装,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:PCR专用LIC克隆套装
编号:BTN120402
规格:1ug
产地:国产|进口
英文名:LIC Cloning Kit for PCR
品牌:百奥莱博
产品简介:
LIC就是不依赖于连接的克隆技术(Ligation-Independent Cloning),它是继限制性内切酶切/连接酶克隆方法后出现的第二代DNA克隆技术。
它效率高,尤其适用于大规模分子克隆。本产品就是基于LIC原理开发的即用型克隆载体,它具有下列特点:
1.操作简单,一管式一步反应,只需加入插入片段即可,客户不需要购买任何额外的酶。
2.时间短,整个过程只要5分钟即可完成。
3.高效,比常用的AT克隆效率更高,阳性率接近于100%。
4.克隆方向和位置精准和可控,适合表达型克隆工作。
5.便于自动化,适合高通量克隆。
6.适用于长片段克隆。
使用及效果:
将PCR获得的插入片段纯化,然后将处理后的插入片段与LIC载体以及溶液A和溶液B加入同一反应管中退火形成环状分子,经转化进大肠杆菌后,细胞的修复系统修复这些突出和缺口而得到完整的重组质粒。
运输及保存:
-20℃,有效期一年。
关键词:PCR专用LIC克隆套装,BTN120402,百奥莱博
我公司的PCR专用LIC克隆套装,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
| 编号 | 名称 |
| PC3301 | 2 x SYBR Green qPCR Mix (Sybr green荧光染料法定量PCR) |
| BTN120202 | 血液保存和DNA纯化套装 |
| BTN70102 | 蛋白质电泳分子量标准 |
| BTN131147 | 山羊抗大鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记 |
| BTN131077 | 组氨酸标签蛋白染色试剂盒 |
| BTN80921 | 96孔板病毒DNAOUT(离心法) |
| DN0901 | 中量/大量组织/细胞基因组DNA提取试剂盒 |
| BTN130808 | 显影粉 |
| BTN90702 | 即用型长片段PCR试剂盒 |
| BTN90902 | 细菌总蛋白质微量提取试剂盒 |
| BTN130426 | 丁基介质 |
| BTN90704 | 土壤RNAOUT |
| BTN90402 | 蛋白胶微量回收试剂盒 |
| BTN131230 | DNase I干粉 |
| BTN100937 | φ29 DNA聚合酶 |
| BTN130828 | DNA去磷酸化试剂盒 |
| PP1101 | 通用蛋白裂解/抽提试剂 |
| BTN130527 | 哺乳动物专用蛋白酶抑制剂 |
| BTN131004 | HRP标记的抗生物素抗体 |
| BTN60609 | T4 DNA连接酶 |
| BTN90904 | 膜结合DNA清除试剂盒 |
| BTN130568 | α-Tubulin小鼠单抗 |
| BTNydyz23 | 细胞凋亡诱导剂和抑制剂 |
| DN0301 | 中量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型) |
| BTN60705 | 一管式植物DNAOUT |
| BTN130572 | COX IV兔单抗 |
| BTN100101 | 镍柱介质 |
| BTN100934 | 电泳级二甲苯蓝FF溶液 |
| CV0401 | pBLUE-T 载体连接试剂盒 |
| BTN130911 | miRNA cDNA第一链合成试剂盒 |
| BTN60302 | 硫酸卡那霉素干粉 |
| BTN130433 | 磁珠动物DNAOUT |
| BTN3091 | 液相RNase清除剂 |
| BTN130529 | 酵母专用蛋白酶抑制剂 |
| BTN60201 | 非酶DNA清除剂 |
| BTN60203 | 硫酸新霉素干粉 |
| BTN100873 | 尿素 |
| BTN130648 | Afu 尿嘧啶-DNA糖基化酶 |
| BTN130574 | 小鼠抗Flag标签单抗 |
| BTN130576 | 小鼠抗HA标签单抗 |
| BTN131017 | 乙酰化牛血清白蛋白 |
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文献和实验) 克隆困难怎么办? 对于大片段载体构建实验而言,难点在于片段扩增效率低、重组 / 连接困难、质粒稳定性差、容易发生断裂等。需针对这些痛点,从技术路线选择、实验细节优化两方面制定策略,具体方案如下: ①建议首先选择「分段克隆 + 拼接」 策略,降低连接难度; ②大片段克隆的关键在于长片段的扩增,所以需要从源头保证实验成功率,即保证模板完整度,在扩增前确保模板未发生降解;其次优化 PCR 体系,比如选择长片段专用 PCR 酶,通过梯度测试选择最佳模板上样量及退火温度等; ③避免高拷贝载体(如 pUC
引物二聚体形成的几率,但是为了下一步的操作就要作出适当的“牺牲”。 很多时候PCR只是初步克隆,之后我们还需要将目的片段亚克隆到各种载体上,那么就需要在PCR这个步骤为下一步的操作设计额外的碱基。以下总结一些为了亚克隆所要设计的序列。 (1)添加限制性内切酶酶切位点 添加酶切位点是将PCR产物进行亚克隆使用得最多的手段。一般酶切位点是六个碱基,另外在酶切位点的5’端还需要加2~3个保护碱基。但是不同的酶需要的保护碱基数目是不相同的,例如:SalⅠ不需要保护碱基,EcoRⅤ需要1个,NotⅠ
,但是为了下一步的操作就要作出适当的“牺牲”。 很多时候PCR只是初步克隆,之后我们还需要将目的片段亚克隆到各种载体上,那么就需要在PCR这个步骤为下一步的操作设计额外的碱基。以下总结一些为了亚克隆所要设计的序列。 a 添加限制性内切酶酶切位点 添加酶切位点是将PCR产物进行亚克隆使用得最多的手段。一般酶切位点是六个碱基,另外在酶切位点的5’端还需要加2~3个保护碱基。但是不同的酶需要的保护碱基数目是不相同的,例如:SalⅠ不需要保护碱基,EcoRⅤ需要1个,NotⅠ需要
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