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- 2026年01月14日
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- 服务名称：
蛋白激光辅助解析串联质谱鉴定（MALDI-TOF-TOF）
- 提供商：
北京青莲百奥生物科技有限公司
- 规格：
量大优惠
MALDI-TOF技术
MALDI-TOF技术主要对单一蛋白质（考/银染的2D或DIGE胶点样本）或成分比较简单的蛋白混合液进行定性分析。
技术原理
MALDI-TOF技术——利用基质辅助激光解吸电离（MALDI）/飞行时间（TOF）技术来表征生物分子，基质辅助激光解析（MALDI）技术是将样品均匀包埋在基质中，基质吸收激光提供的能量而蒸发，携带部分样品分子进入气相，并将一部分能量传递给样品分子使其离子化。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测，即测定离子的质荷比（M/Z）与离子的飞行时间成正比，从而检测离子MALDI-TOF在分子量可测范围内，分辨率和所测分子量的准确性等方面都优于同类技术。采集数据渐变，大大简化从样品制备到数据分析的过程。在windows操作界面下通过鼠标来改变参数，变化激光强度和编制报告。可分别调节离子，加速栅和反射器电压等，控制样品的位置和激光照射的轻度。高准确度的质量数据增强了数据库的查询能力，可减少测量参数和鉴定结构所需的实验数据。分析能力强-温和的离子化条件增强了测量生物多具体，蛋白质，肽和DNA的能力。
实验流程
仪器型号
MALDL-TOF/TOF质谱仪4800（ABI）,布鲁克ultrafleXtreme MALDI TOF/TOF
技术优势
1.适合较纯、成分简单或单一的蛋白样品，如银染或考染的蛋白胶点、标签纯化的蛋白样品
2.周期短
应用领域
蛋白质或多肽的鉴定分析
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文献和实验基于质谱的蛋白质鉴定，第6节：MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
MALDI-TOF-MS最初用于等分试样（1μL或更少）样品的质谱鉴定，用于检查肽的纯度或PMF。大批量的样品测定，往往使用Edman降解法测序或ESI-MS，如四极（Q）-TOF-MS 质谱。做出以上选择的原因，主要是因为MALDI技术进行分析，上样量不能超过0.5μL。这种样品制备方法极大地限制了MALDI技术检测的整体灵敏度，并且还限制了可以分析的肽浓度，因为肽和基质共结晶过程的质量对于检测的灵敏度和准确性都非常重要。MALDI技术通常将等体积的样品和MALDI基质溶液混合，将肽混合
assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS）在临床得到了更广泛的应用，尤其是对微生物标本的快速鉴定。 一、质谱鉴定微生物的原理 在应用MALDI-TOF MS时，通常将微生物样本与一种饱和的低分子量无机化合物溶液（称为基质）进行混合加在靶板上，待干后样本与基质共结晶后形成了以基质包裹构架的样本固体沉淀。样本基质结晶体经激光辐射，基质从激光中吸收能量使样品吸附，基质与样品之间发生
-MS/MS系统使一次实验鉴定上万个蛋白成为可能。基于LC-MS/MS系统方案也叫shot-gun法，质谱的采集模式为DDA（Data Dependent Acquisition）。在这种模式下，质谱根据离子化的肽段母离子的强度，依次选择10到20个强度最大的离子进入串联质谱，进行进一步碎裂，然后经过与模板蛋白质数据库比较确认。这种方法无疑丢失了大量有用的肽段母离子信息。此外，经过二级碎裂的二级谱图，在后期使用软件鉴定中也仅有少量谱图得到解析（约30%），大部分谱图依然得不到有效利用。由于质谱选择离子的随机
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