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- Thermo scientific -fermentas
- ER2101
- 2025年10月07日
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|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 10X Buffer Tango™ | ||||
| ER2101 | 1000 u (10 u/µl) | 1.00 ml | ER2101 |
Reaction conditions
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| Tango™ | 65°C | 50-100 | 50-100 | 20-50 | 20-50 | 100 | 20-50 | 1X or 2X |
Lambda DNA
1.4%琼脂糖
119 切割位点
100%酶活性的反应条件
1X 缓冲液Tango™：
33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
65°C酶切。为确保高效酶切，反应体系中加入石蜡油防止蒸发。
33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
65°C酶切。为确保高效酶切，反应体系中加入石蜡油防止蒸发。
保存缓冲液
TscAI保存在：
10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
连接和重新酶切
50倍TscAI过量酶切后，超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。
备注
- 37°C酶切时的酶活性低于5% 。
- 低盐、pH> 8.0、高浓度甘油(>5%)或过量酶切都会导致星活性。
- TscAI酶切产生具有3’端9个碱基突出的DNA分子。 为了避免出现非正常条带，上样电泳前建议采用6X Loading Dye & SDS溶液(#R1151)处理样本，或者在酶切DNA产物中加入SDS并加热。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
双酶切
采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 可能重叠 – 影响不确定。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 无重叠 – 不影响。
EcoKI: 可能重叠 – 影响不确定。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 0 | 50-100 | |||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 119 | 6 | 8 | 12 | 10 | 10 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 10 | 10 | 10 | 10 | 15 | 13 |
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文献和实验相关实验
内切酶列表：Enzymes Generating 3-protruding Ends
CASTG(2/-7)^ TspRI NNCASTGNN ^(0/2)CATCC* BseGI NN
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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