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Tru1I (MseI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER0981
  • 2025年10月08日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : R
    • - 孵育温度65°C
    • - 连接效率90%
    • - 80°C加热20分钟不会使酶失活
    • - LO合格
    • - HC: 提供高浓度酶
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer R 10X Buffer Tango™
    ER0981 300 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER0981
    ER0982 1500 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER0982
    ER0983 HC, 1500 u (50 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER0983
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    R 65°C 50-100 50-100 20-50 100 50-100 100 1X or 2X

    Lambda DNA
    1.4%琼脂糖
    195 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液R:
    10 mM Tris-HCl (pH 8.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.1 mg/ml BSA。
    65°C酶切。为确保高效酶切,反应体系中加入石蜡油防止蒸发。

    保存缓冲液
    Tru1I保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.4, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍Tru1I过量酶切后,超过90%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    备注
    37°C酶切时只有10%的酶活性。 因此37°C酶切时推荐使用高浓度的Tru1I, HC (#ER0983)。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    兼容性末端
    Csp6I, FspBI, NdeI, VspI。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 无重叠 – 不影响。
    EcoKI: 可能重叠 – 阻止酶切。
    EcoBI: 无重叠 – 不影响。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    EcoKI (AAC(N)6 GTGC)

    5'...TTAm6AC(N)6 G TGC...3'
    3'...AAT TG(N)6 Cm6ACG...5'

    阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    0 0-20 50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    195 35 63 15 13 13
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    18 18 19 19 16 12

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