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- Thermo scientific -fermentas
- ER1981
- 2025年10月07日
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 10X Buffer Tango™ | ||||
| ER1981 | 200 u (10 u/µl) | 1.00 ml | ER1981 |
| Recommended buffer for 100% activity | Optimal temperature | Enzyme activity in Fermentas buffers, % | Tango™ buffer for double digestion | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| B (blue) 1X |
G (green) 1X |
O (orange) 1X |
R (red) 1X |
Tango™ (yellow) 1X / 2X |
||||
| Tango™ | 55°C | 50-100 | 20-50 | 0-20 | 20-50 | 100 | 20-50 | 1X or 2X |
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
17 切割位点
33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
55°C酶切。
10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。
备注
- 37°C酶切时只有10%的酶活性。
- 重叠的Dam甲基化会影响SmoI酶切。为避免Dam甲基化影响，样本DNA需要从dam-, dcm- 菌株中抽提，如GM2163 (#M0099)。
- 低盐、pH> 8.0、高浓度甘油(>5%)或过量酶切都会导致星活性。
C^TCGAG – Eco88I, XhoI, SalI。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 可能重叠 – 不影响。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dam (GATC) | 5'...CTYRAGm6A TC ...3' |
部分影响 |
| CpG | 5'...CTm5C G GT...3' |
不阻止酶切 |
| bp from the recognition site to fragment end | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 0 | 50-100 | |||
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 17 | 5 | 5 | 6 | 4 | 4 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 4 | 4 | 5 | 5 | 4 | 4 |
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文献和实验，可暂时放于超低温冰箱保存。 Thermo Scientific Revco超低温冰箱具有2台1HP工业级压缩机，高效的制冷能力；双风扇设计散热能力快，环境耐受32℃高温不报警；钥匙锁孔开关，保证样品的安全可靠；以及内门、门锁等人性化设计。Revco超低温冰箱70年的历史打造专业和品质，不愧为世界一流品牌。 图 3 Thermo Scientific Revco超低温冰箱 六、恒温水浴 从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温
到液氮内(-196℃)，这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。 Thermo Scientific Revco超低温冰箱具有2台1HP工业级压缩机，高效的制冷能力;双风扇设计散热能力快，环境耐受32℃高温不报警;钥匙锁孔开关，保证样品的安全可靠;以及内门、门锁等人性化设计。Revco超低温冰箱70年的历史打造专业和品质，不愧为世界一流品牌。 六、恒温水浴 从液氮或超低温冰箱中取出
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
重要。为了确保准确进行 DNA 拷贝，请确保选择高保真 DNA 聚合酶。高保真 PCR 酶具有 3'-5’ 核酸外切酶校对活性。当结合错误匹配的碱基对时，DNA 聚合酶停顿，导致合成暂延。合成暂延 允许去除错误匹配的核苷酸并使用正确的核苷酸取代。 保持序列准确的 DNA 聚合酶的绝佳选择是 Invitrogen SuperFi 或 Thermo Scientific Phusion 高保真DNA聚合酶。这两种酶具有高保真度，准确度是 Taq DNA 聚合酶的 300 倍或 52 倍，并且具有很高的产率。 Q
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