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SchI (MlyI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1371
  • 2025年10月05日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : Tango™
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率90%
    • - 星活性
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - 重组酶
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer Tango™
    ER1371 1000 u (10 u/µl) 1.00 ml ER1371
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    Tango™ 37°C 20-50 50-100 0-20 0-20 100 0-20 1X

    Lambda DNA
    1.4%琼脂糖
    61 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液Tango™:
    33 mM Tris-acetate (pH 7.9, 37°C), 10 mM Mg-acetate, 66 mM K-acetate, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    SchI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    10倍SchI过量酶切后,大约90%的酶切产物可以连接,超过90%的连接产物可以重新酶切。

    备注
    • 超过10倍过量酶切会导致星活性。
    • SchI可能会吸附在切割的DNA分子上,从而改变DNA条带的电泳纯移率。为了避免出现非正常条带,上样电泳前,建议采用6X Loading Dye & SDS溶液(#R1151)处理样本,或者在 DNA酶切产物中加入SDS并加热处理。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 不影响。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...GAGTm5C G ...3'
    3'...CTCA Gm5C ...5'

    不阻止酶切
    CpG

    5'...m5C G AGTC...3'
    3'... Gm5C TCAG...5'

    不阻止酶切
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    61 10 8 4 4 3
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    7 6 6 6 6 4

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 富尔根氏反应 Feulgen′s reaction

      指由R.Feulgen和H.Rossenbeck(1924)提出的鉴定DNA的细胞化学反应。将细胞用 RNHCl在60℃下水解(水解时间由固定液而定)。如用Schi-ff′s试剂来作用,由于嘌呤碱基特异性的游离所生成的脱氧核糖的醛基与复红(fuchsin)反应,核染色体染成紫红色,表示DNA的存在。对由在最适条件基础上的富尔根反应所显色的DNA,可用显微分光测定法进行定量。  

    • 内切酶列表:Enzymes Generating Blunt Ends

      ^(5/5)GACTC* SchI GAGCGG(-3/-3)^* MbiI GAG^CTC Ecl136II GAGTC(5/5)^* SchI GAT^ATC Eco32

    • Cleavage Efficiency Close to the&nbs

      ScaI  0-20 50-100 SchI  50-100 SdaI  0 0-20 20-50 SduI  50-100

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