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- Thermo scientific -fermentas
- FD0663
- 2025年10月02日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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大量
|
- 推荐的缓冲液 : FastDigest®缓冲液
- 孵育温度37°C
- 连接效率90%
- CpG甲基化可能影响DNA切割
- 热失活65°C, 5 min
- 蓝/白鉴定
- LO合格| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD0663 | 100 µl (100 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD0663 | |
| FD0664 | 200 µl (200 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD0664 | |
Reaction conditions
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 5 | 5 | 5 | 5 | 1 | 65°C, 5 min | 16 |
Lambda DNA
0.7%琼脂糖
3 切割位点
配方
1 µl (1 FDU)是指在37°C，1X FastDigest® 缓冲液中5分钟内酶切1 µg lambda DNA/Eco81I片段所需的酶量。
推荐反应条件
1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液，37°C。
1 µl FastDigest® SmaI可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA/Eco81I片段;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
1 µl FastDigest® SmaI可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA/Eco81I片段;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 无重叠 – 不影响。
CpG: 完全重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| CpG | CCCGGG | 阻止酶切 |
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 3 | 0 | 1 | 0 | 1 | 1 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 0 |
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文献和实验相关实验
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FastDigest® SmaI
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