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NmuCI (Tsp45I)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1511
  • 2025年10月03日
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      大量

    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : R
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - CpG甲基化重叠可能影响DNA切割
    • - 热失活65°C, 20 min
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer R 10X Buffer Tango™
    ER1511 200 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER1511
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    R 37°C 0-20 20-50 50-100 100 20-50 50-100 1X or 2X

    Lambda DNA
    1.4%琼脂糖
    81 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液R:
    10 mM Tris-HCl (pH 8.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 100 mM KCl, 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    NmuCI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    50倍NmuCI过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    兼容性末端
    Eco91I (G^GTCACC), MaeIII (^GTGAC)。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 可能重叠 – 影响不确定。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...GTCAm5C G ...3'
    3'...CAGT Gm5C ...5'

    部分影响
    CpG

    5'...m5C G TCAm5C G ...3'
    3'... Gm5C AGT Gm5C ...5'

    部分影响
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    20-50 50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    81 8 8 9 4 4
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    4 4 4 4 5 7

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