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大量
|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X FastDigest® Buffer | 10X FastDigest® Green Buffer | ||||
| FD0194 | 100 µl (100 react.) | 1.00 ml | 1.00 ml | FD0194 | |
Reaction conditions
| Reaction temperature | Digestion time with 1µl of FastDigest® enzyme, min | bp from end of DNA required for complete digestion | Thermal inactivation | Incubation time without star activity, hours | |||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Lambda, 1µg/20µl | Plasmid DNA, 1µg/20µl | PCR product, ~0.2µg/30µl | Genomic DNA, 1µg/10µl | ||||
| 37°C | 5 | 5 | 5 | 5 | 2 | No (chloroform extraction) |
16 |
Lambda DNA
1.0%琼脂糖
74 切割位点
配方
1 µl (1 FDU)是指在37°C,1X FastDigest® 缓冲液中5分钟内酶切1 µg lambda DNA所需的酶量。
推荐反应条件
1X FastDigest®缓冲液或 1X FastDigest® Green 缓冲液,37°C。
1 µl FastDigest® Sau96I (Cfr13I)可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
1 µl FastDigest® Sau96I (Cfr13I)可在
– 5分钟内酶切1 µg lambda DNA;
– 5分钟内酶切1 µg质粒DNA;
– 5分钟内酶切0.2 µg PCR扩增产物;
– 5分钟内酶切1 µg基因组DNA或30分钟内酶切5 µg基因组DNA。
商业化同裂酶
采用REsearch™软件寻找同功酶。
兼容性末端
G^GWCC – FastDigest® AvaII ( Eco47I), FastDigest® PpuMI (Psp5II), FastDigest® RsrII (CpoI), FastDigest® SanDI (KflI), AvaII, CpoI, Eco47I, PpuMI, Psp5II, SanDI。
甲基化影响
Dam: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 可能重叠 – 阻止酶切。
CpG: 可能重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
Dcm: 可能重叠 – 阻止酶切。
CpG: 可能重叠 – 阻止酶切。
EcoKI: 无重叠 – 不影响。
EcoBI: 无重叠 – 不影响。
| Methylation type | Sequence | Cleavage effect |
|---|---|---|
| Dcm (CCWGG) | 5'...GGNCm5CW GG ...3' |
阻止酶切 |
| CpG | 5'...GGNCm5C G ...3' |
阻止酶切 |
| Lambda | ΦX174 | M13mp18/19 | pBR322 | puc18/19 | pUC57 |
|---|---|---|---|---|---|
| 74 | 2 | 4 | 15 | 6 | 8 |
| pTZ19R/U | pTZ57R | pBluescriptIIKS(-/+) | pBluescriptIISK(-/+) | pACYC177 | pACYC184 |
| 6 | 8 | 8 | 8 | 9 | 11 |
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