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天根生化科技(北京)有限公司
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10次
产品简介
本试剂盒采用独特的硅胶膜吸附技术,高效专一地结合质粒DNA。同时采用特殊的溶液EBT和过滤器CS1,可有效的去除内毒素、蛋白等杂质;整个提取过程仅需1h,方便快捷。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和转染多种细胞等实验。
推荐每次菌液使用量:高拷贝质粒推荐使用量为50 ml,得率一般在250-750 μg左右;低拷贝质粒推荐使用量为100 ml,得率一般在100-300 μg左右。
储存条件
第一次使用前将RNase A加入溶液P1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存6个月。单独包装的RNase A 在室温可稳定保存12个月以上。本试剂盒在室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存时,若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃溶解沉淀。
质粒DNA浓度及纯度检测
得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50 μg/ml 双链DNA。纯化的质粒DNA OD260/OD280通常在1.7-1.9左右,可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的实验中。
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- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验[1] Wu Y, Tu G, Liu J, et al. Tcp1: A Molecular Chaperone Influencing Acute Myeloid Leukemia Carcinogenicity and a Prospective Therapeutic Target[J]. Available at SSRN 4962616.
血液基因组 DNA 提取试剂盒操作指南(DP349) ——中量全血操作流程(1-5 ml血样)
以下操作按照天根产品 DP349 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 抗凝全血(本实验以5 ml人的抗凝全血为例 )2. 移液器及配套无菌枪头(2.5 μl,10 μl ,200 μl ,1ml),15 ml离心管3. 无水乙醇,70%乙醇,干净的吸水纸4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机本文版权归天根生化科技(北京)有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
程度等等。 现在大部分质粒提取都用试剂盒, 根据实验需要我们可以选择不同级别的产品: 1. 从纯度上看:常规操作(如酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化),普通纯度的质粒即可;对于转染实验,则需要无内毒素质粒提取试剂盒。 2. 从提取量上看:1-20μg,小量提取试剂盒;20-40μg,中量提取试剂盒;大于40μg,大量提取试剂盒。 3. 宿主菌类别上:主要分为普通细菌质粒提取试剂盒,真菌质粒提取试剂盒,酵母菌质粒提取试剂盒。 举例:SunShinecleanTM无内毒素质粒小量抽提试剂盒采用新型
pl198242:请问各位大侠:用质粒提取试剂盒从大肠杆菌中提取质粒后,想用于细胞转染,还需要另外的操作来除菌么? 另外是否还需要纯化?丁香园网友boboyuan认为:不需要,当然,前提是你提取质粒时操作是规范的。提完的质粒放-4度保存,转染的时候直接用就行了。丁香园网友hzh_0796认为:看你是用什么方法提得,纯度如何我用小提的时候发现,最后一步用洗脱液洗时将吸附柱放进一个新的EP管时盖子居然盖不上,硬着头皮这样拿去离心,自己都不放心用。后面测了下浓度好低,只有89微克每毫升。看来小提











