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- 百奥莱博
- ALH083-QWT
- 北京
- 2025年08月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
402
- 英文名：
Plasmid Extraction Kit (solution type, no endotoxin, transfection grade)
- 保质期：
12个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
室温
特别提示：包括无内毒素质粒中量提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：无内毒素质粒中量提取试剂盒
英文名称：Plasmid Extraction Kit (solution type, no endotoxin, transfection grade)
产品规格：20次
本试剂盒适用于中量高纯或者转染级质粒制备和BAC/PAC大型质粒制备。用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA，采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂，只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质，获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右，得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作，方法简单，不需特殊设备，无需过柱，不用酚*仿抽提；基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒，不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA，对质粒损伤小，即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒，只要碱裂解法能够提取，就可以有效纯化。可选择任意小体积溶解质粒，浓度可高达3μg/μl。
试剂盒组份(20次)：
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75
溶液P1—————————————65ml
溶液P2—————————————50ml
溶液PⅢ-————————————50ml
杂质清除剂A-——————————1.5ml
杂质清除剂B-——————————15ml
内毒素清除剂——————————5ml
试剂盒特点：
1.不需要使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从50-70 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中，可快速提取100μg -250μg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率达80-90 %。
2.获得的质粒产量高，浓度高，超螺旋比例高，纯度好，可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3.内毒素含量极低（<0.1 EU/μg DNA），可直接应用于细胞转染。
注意事项
1. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒，应加大菌体使用量，同时按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大质粒时操作动作要轻柔，应该使用剪大了开口的吸头，防止机械剪切对DNA 的损坏。
3. DNA 沉淀液沉淀离心后，可能看不到明显沉淀。如未见沉淀，担心DNA 丢失，可保留上清液，待完成全部操作后电泳鉴定，以确定是否获得终产物（数百微克DNA 离心沉淀在管的侧壁上，可能无法看到明显团块）。
4. 得到的质粒DNA 可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1 相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2 条或者多条DNA 条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过95%。
5. 质粒DNA 确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道确切大小。
储存条件：室温，有效期12个月。
本制品别名：细胞转染用质粒制备试剂盒|高纯度质粒重量提取试剂盒|细胞转染质粒提取试剂盒|无内毒素培养菌质粒提取试剂盒
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文献和实验血液基因组 DNA 提取试剂盒操作指南（DP349） ——中量全血操作流程（1-5 ml血样）
以下操作按照天根产品 DP349 血液基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行，所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品，样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备：1. 抗凝全血(本实验以5 ml人的抗凝全血为例 )2. 移液器及配套无菌枪头（2.5 μl，10 μl ，200 μl ，1ml），15 ml离心管3. 无水乙醇，70%乙醇，干净的吸水纸4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机本文版权归天根生化科技（北京）有限公司所有,仅供个人学习使用,请勿转载
问：我想用纸脂体转染法将质粒稳定转染入肿瘤细胞，请问可以选择哪种试剂盒？ 因为我不报销费用，所以想选一种即好用又较为便宜的，请求指点。谢谢答：您的情况我们去年也曾遇到过。目前市面上的质粒提取试剂盒林林总总，令人难以取舍。我觉得首先应该根据自己的需要来选取。进口的试剂盒，比如qiagene，omiga，promega等固然好，但是价格较贵，如果自己的实验要求不是很高的话，用这些试剂盒感觉有浪费的嫌疑（当然经费充足无可厚非）。但是有些国产的试剂盒不怎么令然放心，象楼主这样做稳定转染的，要花费很多
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