TXNIP与GLUT9之间的分子相互作用构成高尿酸应激下体外尿酸转运失调的基础

背景：本研究旨在探讨硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）在高尿酸血症中的作用，特别是研究其对尿酸（UA）代谢及相关过程的影响。方法：使用人肾小管上皮细胞（HK-2）建立高尿酸血症细胞模型。利用DCFH-DA探针定量细胞内的活性氧（ROS）水平。建立TXNIP过表达和敲低的细胞系。利用整合代谢组学和转录组学分析研究TXNIP过表达对HK-2细胞UA代谢的影响。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blot评估TXNIP及UA转运蛋白GLUT9、ABCG2、URAT1和OAT3的表达水平。通过免疫共沉淀研究TXNIP与GLUT9之间的关联。此外，利用免疫荧光标记检测TXNIP和GLUT9的亚细胞定位。结果：高UA环境刺激ROS生成并显著升高TXNIP表达。代谢组学和转录组学研究提示TXNIP可能改变HK-2细胞中的UA代谢通路，从而影响UA稳态。相反，TXNIP过表达通过升高GLUT9表达增强HK-2细胞中UA的净摄取，而TXNIP敲低则产生相反效果。免疫荧光标记显示TXNIP和GLUT9在HK-2细胞中共定位。CO-IP研究表明TXNIP与GLUT9相互作用。结论：TXNIP可能通过ROS诱导的上调，并随后通过与UA转运蛋白GLUT9的相互作用增强其表达，影响高尿酸血症中的UA重吸收，从而影响高尿酸血症的进展。