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AasI (DrdI)

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  • Thermo scientific -fermentas
  • ER1721
  • 2025年11月04日
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    • - FastDigest®限制酶
    • - 推荐的缓冲液 : B
    • - 孵育温度37°C
    • - 连接效率95%
    • - 星活性
    • - CpG甲基化可能影响DNA切割
    • - 热失活80°C, 20 min
    • - 基因组级别
    • - LO合格
    Catalog# Size, concentration Supplied with: Certificate of Analysis MSDS
    10X Buffer B 10X Buffer Tango™
    ER1721 300 u (10 u/µl) 1.00 ml 1.00 ml ER1721
    Reaction conditions
    Recommended buffer for 100% activity Optimal temperature Enzyme activity in Fermentas buffers, % Tango™ buffer for double digestion
    B (blue)
    1X
    G (green)
    1X
    O (orange)
    1X
    R (red)
    1X
    Tango™ (yellow)
    1X / 2X
    B 37°C 100 20-50 0-20 0-20 50-100* 0-20 1X*
    * –星活性比5倍过量酶切(5 units x 1 hour)还强。

    Lambda DNA
    0.7%琼脂糖
    3 切割位点

    100%酶活性的反应条件
    1X 缓冲液B:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 37°C), 10 mM MgCl2 , 0.1 mg/ml BSA。
    37°C酶切。

    保存缓冲液
    AasI保存在:
    10 mM Tris-HCl (pH 7.5, 25°C), 100 mM�Cl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.2 mg/ml BSA和50% (v/v)甘油。

    连接和重新酶切
    10倍AasI过量酶切后,超过95%的酶切产物可以连接和重新酶切。

    琼脂糖包埋DNA酶切
    至少需要5 unit限制酶才能在16小时内完全切割1 µg琼脂糖包埋的λ DNA。

    备注
    超过10倍过量酶切会导致星活性。

    商业化同裂酶
    采用REsearch™软件寻找同功酶。

    双酶切
    采用DoubleDigest™软件确定双酶切的最佳条件。

    甲基化影响
    Dam: 无重叠 – 不影响。
    Dcm: 无重叠 – 不影响。
    CpG: 可能重叠 – 部分影响。
    EcoKI: 无重叠 – 不影响。
    EcoBI: 无重叠 – 不影响。

    Methylation type Sequence Cleavage effect
    CpG

    5'...m5C G AC(N)6 GTC...3'
    3'... Gm5C TG(N)6 CAG...5'

    部分影响
    CpG

    5'...m5C G AC(N)6 GTm5C G ...3'
    3'... Gm5C TG(N)6 CA Gm5C ...5'

    影响不确定
    CpG

    5'...GAm5C G (N)5 GTC...3'
    3'...CT Gm5C (N)5 CAG...5'

    部分影响
    CpG

    5'...GAm5C G (N)4m5C G TC...3'
    3'...CT Gm5C (N)4 Gm5C AG...5'

    影响不确定
    Cleavage efficiency close to the termini of PCR fragments
    bp from the recognition site to fragment end
    1 2 3 4 5
    50-100
    Number of recognition sites in DNA molecules
    Lambda ΦX174 M13mp18/19 pBR322 puc18/19 pUC57
    3 1 1 2 2 2
    pTZ19R/U pTZ57R pBluescriptIIKS(-/+) pBluescriptIISK(-/+) pACYC177 pACYC184
    2 2 2 2 1 1

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    • 内切酶列表:Enzymes Generating 3-protruding Ends

      ^NNGTC Eam1105I   N         GACNNNN^NNGTC   AasI   NN      

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