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- Thermo scientific -fermentas
- EP0351
- 2025年11月03日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
大量
|
| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| 5X Reaction Buffer | ||||
| EP0351 | 1000 u (20 u/µl) (for 25 reactions of 20 µl) |
1.00 ml | EP0351 | |
| EP0352 | 5000 u (20 u/µl) (for 125 reactions of 20 µl) |
5 x 1.00 ml | EP0352 |
- Features
-
- 高产量制备全长的第一链cDNA，最长可达9 kb。
- 最佳活性温度为37°C。
- 合成掺入修饰核苷酸，如Cy3-、Cy5-、罗丹明-、氨基-、荧光-标记的核苷酸。
- Applications
-
- 第一链cDNA合成，用于RT-PCR和实时RT-PCR。
- 合成cDNA，用于克隆和表达研究。
- 制备芯片研究用标记的cDNA探针。
- DNA标记(3)。
- 引物延伸法分析RNA (3)。
说明
M-MuLV Reverse Transcriptase (RT)是DNA和RNA依赖性的DNA聚合酶，可以利用RNA或DNA诱发DNA合成。该酶还具有RNase H活性，可以特异性降解RNA-DNA复合体中的RNA (1, 2)。
来源
含有克隆基因pol 的大肠杆菌细胞。该基因编码小鼠白血病病毒逆转录酶。
分子量
77.8 kDa，单体。
活性单位定义
1 个活性单位是指在37°C、10分钟内将1 nmol dTMP合成掺入多聚的核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量。
酶活性分析混合物：50 mM Tris-HCl (pH 8.3), 4 mM MgCl2 , 10 mM �TT, 50 mM KCl, 0.5 mM dTTP, 0.4 MBq/ml [3 H]-dTTP, 0.4 mM �olyA・oligo(dT)12-18 。
保存缓冲液
保存缓冲液组分：
50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 1 mM �DTA, 5 mM DTT, 0.1% (v/v) Triton X-100和50% (v/v)甘油。
50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 1 mM �DTA, 5 mM DTT, 0.1% (v/v) Triton X-100和50% (v/v)甘油。
5X 反应缓冲液
250 mM Tris-HCl (pH 8.3, 25°C), 250 mM KCl, 20 mM MgCl2 , 50 mM DTT。
质量控制
相关测试表明无内切和外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。 功能测试：第一链cDNA合成。
抑制与失活
- 抑制剂：金属螯合剂、无机磷酸盐、焦磷酸和多胺(3)。
- 失活：70°C加热10分钟。
备注
M-MuLV RT的RNase H活性比禽类成髓细胞瘤逆转录酶(AMV)低很多(1, 2)。
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M-MuLV Reverse Transcriptase
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