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- Thermo scientific -fermentas
- EP0611
- 2025年11月03日
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- 详细信息
- 技术资料
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大量
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS | |
| 10X TrueStart™ Taq Buffer | 25 mM MgCl2 | ||||
| EP0611 | 200 u (5 u/µl) | 1.25 ml | 1.25 ml | EP0611 | |
| EP0612 | 500 u (5 u/µl) | 2 x 1.25 ml | 2 x 1.25 ml | EP0612 | |
| EP0613 | 5 x 500 u (5 u/µl) | 10 x 1.25 ml | 10 x 1.25 ml | EP0613 | |
- Features
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- 在热启动DNA polymerases系列的所有产品中，该酶的活化速度最快。
- PCR特异性高 一 降低错配效应和减少引物二聚体的生成。
- 增强的PCR敏感性。
- 使用方便，室温配制PCR反应体系。
- 扩增产物具有3’-dA突出末端。
- Applications
-
- 高通量热启动PCR。
- RT-PCR。
- 高特异性扩增复杂的长达3 kb的基因组和cDNA模板。
- 扩增低拷贝DNA模板。
- 实时PCR。
- 多重PCR。
- 制备TA克隆用PCR产物。
说明
TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase设计用于热启动PCR。该技术可增加DNA扩增的特异性、敏感性和产量(1-5)。TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的重组Taq DNA polymerase，蛋白分子的氨基酸残基 上增加了热不稳定的封闭基团。该酶在室温下没有活性，避免形成引物二聚体和非特异性延伸。TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase在PCR的起始变性步骤快速活化。
无需额外的活化过程是该酶与其它热启动DNA polymerases 的重要区别，非常适合自动热启动PCR 和快速PCR。活化的TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase催化5’=>3’方向合成DNA、无可检测的3’=>5’ 校正外切酶活性、具有较低的5’=>3’ 外切酶活性。酶活化前检测不到这些活性。
分子量
94 kDa，单体。
活性单位定义
1 个活性单位是指在74°C，30分钟内将10 nmol脱氧核糖核苷酸合成掺入多聚核苷酸(吸附在DE-81上)所需的酶量。
酶活性分析混合物：25 mM TAPS (pH 9.3, 25°C), 50 mM KCl, 2 mM MgCl2 , 0.2 mM各种dATP, dGTP, dTTP, 0.1 mM dCTP, 0.75 mM活化的鲑鱼精DNA, 0.4 MBq/ml [3 H]-dCTP。
保存缓冲液
保存缓冲液组分：
20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5% (v/v) Tween 20, 0.5% (v/v) Nonidet P40和50% (v/v)甘油。
20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.5% (v/v) Tween 20, 0.5% (v/v) Nonidet P40和50% (v/v)甘油。
10X TrueStart™ Taq Buffer
200 mM Tris-HCl (pH 8.3, 25°C), 200 mM KCl, 50 mM (NH4 )2 SO4 。
质量控制
相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染。功能测试：PCR。
抑制与失活
- 抑制剂：阴离子去污剂(脱氧胆酸、肌氨酰和SDS的浓度分别高于0.06、0.02和0.01%时)(5)。
- 失活：酚/氯仿抽提。
图1。TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase与其它商业化热启动Hot Start PCR系统扩增复杂模板的特异性比较。
根据厂家的使用推荐，扩增人beta-globine基因(2 kb DNA片段)。
M – GeneRuler™100 bp Plus DNA Ladder
1-2 – TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase
3-4 – Taq DNA Polymerase (化学修饰), 厂家A
5-6 – Taq DNA Polymerase (温度依赖性抑制剂), 厂家B
7-8 – Taq DNA Polymerase (抗体原理), 厂家C
9-10 – Taq DNA Polymerase (非热启动), Fermentas
根据厂家的使用推荐，扩增人beta-globine基因(2 kb DNA片段)。
M – GeneRuler™100 bp Plus DNA Ladder
1-2 – TrueStart™ Hot Start Taq DNA Polymerase
3-4 – Taq DNA Polymerase (化学修饰), 厂家A
5-6 – Taq DNA Polymerase (温度依赖性抑制剂), 厂家B
7-8 – Taq DNA Polymerase (抗体原理), 厂家C
9-10 – Taq DNA Polymerase (非热启动), Fermentas
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