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- Thermo scientific -fermentas
- K0231
- 2025年10月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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| Catalog# | Size, concentration | Supplied with: | Certificate of Analysis | MSDS |
| Water, nuclease-free | ||||
| K0231 | 2 x 1.25 ml (for 200 react. of 25 µl) | 2 x 1.25 ml | K0231 | |
| K0232 | 10 x 1.25 ml (for 1000 react. of 25 µl) | 10 x 1.25 ml | K0232 | |
| K0233 | 4 x 12.5 ml (for 4000 react. of 25 µl) | 2 x 30.00 ml | K0233 |
- Features
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- 敏感性 一 可检测低拷贝模板。
- 特异性 一 Maxima® Hot Start Taq DNA Polymerase和优化的缓冲液可以防止非特异性扩增和形成引物二聚体。
- 线性范围广 一 可精确定量9个数量级。
- 通用 一 与几乎所有的热循环仪兼容。
- 可重复性、使用方便 一 即用型2X Mix，减少加样错误和反应体系配制时间。
- Applications
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- 实时PCR，使用序列特异性探针。
- 实时RT-PCR，使用序列特异性探针。
Maxima® Hot Start Taq DNA Polymerase与配套的优化缓冲液可确保PCR 的特异性和灵敏度。该Master Mix 中还含有dUTP，与Uracil DNA glycosylase (UDG) 配合使用可以防止携带污染。ROX为内参用荧光染料。
Maxima® Probe/ROX qPCR Master Mix (2X) 在荧光定量PCR中的应用可以确保基因组、质粒、病毒DNA 和cDNA 模板定量的重复性、特异性和敏感性。该产品与绝大多数厂商的实时热循环仪兼容，如Applied Biosystems、Eppendorf、Corbett、Bio-Rad和Roche。
以10 倍梯度稀释Jurkat 细胞的总RNA (1 ng - 1 pg)为模板两步法RT-PCR扩增人的PPP1CAR基因。第一链cDNA经RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis Kit (#K1621)制备；制备的cDNA 然后用Maxima® Probe/ROX qPCR Master Mix (2X) 扩增(PPP1CA基因TaqMan® 特异性引物，ABI PRISM® 7000 )。使用该产品可成功检测1 pg的总RNA。NTC为无模板对照。
以2 倍梯度稀释的人基因组DNA ( 0.5 μg - 1 ng) 为模板扩增人的PGK1基因(25 μl体系，每个扩增设置4 个平行实验。ABI PRISM® 7000仪)。NTC 为无模板对照。
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文献和实验。G. 反应体系的设置：A-G这五个步骤简单设置好，可以保存，修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料，默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面；也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料，所以选择“none”。设置好之后，就可以把配置好的PCR管放进仪器，点击RUN！Real-time qPCR数据分析1. Real-time qPCR常见参数基线
%，避免引物内含有互补序列，3』端尽量不要出现含有连续三个以上的 G 或 C 的片段，真核基因设计引物时最好跨内含子哦。 选择合适 ROX 参照染料 各位同学在选购产品、做实验时，首先要弄清自己实验室的仪器对应哪种 ROX（High 还是 Low）！试剂买回来，样也加好了，最后发现不能用在自家仪器上，内心也一定是很崩溃。诺唯赞的染料法荧光定量专用预混液提供各种 ROX 供选择，如果不想这么麻烦，ChamQTM Universal SYBR® qPCR Master Mix （Q711）那是极好
Master Mix定量cDNA。由于配备了热启动DNA聚合酶，GoTaq® qPCR Master Mix在使用实时PCR仪器的标准或快速模式时，都能获得特异、灵敏和高效的最佳qPCR重复结果。GoTaq® qPCR Master Mix含有BRYT™ GREEN染料，是SYBR® Green I染料亮度的两倍。这两个步骤的卓越性能使研究者能在更宽的线性范围内观察到更早的定量循环值（quantification cycle value）。 GoTaq®两步法RT-qPCR系统是一种
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