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Southern Blot印迹杂交
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上海英拜生物科技有限公司
Southern Blot是检测基因组样本中特定DNA序列的一种方法。主要原理是根据碱基互补配对原则,具有一定同源性的两条核酸单链在适宜环境中可杂交形成双链。通过凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的待检DNA分子,转移至尼龙膜或其他固相支撑物上,固定后与标记好的探针进行杂交,利用放射自显影或酶反应显色, 从而检测特定DNA分子的含量。
Southern Blot实验流程
Southern Blot实验流程
- 基因组提取:基因组要求完整性好,纯度高
- 基因组酶切
- 电泳分离酶切好的DNA样品: 20~40ug/泳道, 25-30V稳压电泳12-24h。
- 转膜
- 探针制备
- 预杂交
- 杂交
- 检测
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文献和实验相关实验
相关专题 本文主要介绍了利用Southern印迹杂交技术来获得DNA分子中基因编码区的大小和位置的实验原理、方法步骤。主要分成待测核酸样品的制备和 琼脂 糖凝胶电泳分离待测DNA样品两部分。 Southern印迹杂交仪器 实验原理 核酸分子杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原则形成
for 2 hours. Blot can be stored under vacuum wrapped in foil.
SOUTHERN BLOT 1. Run the gel as normal. Often for genomic southerns it is desirable to run long gels (18cm) over 4-6hrs. 2. Photograph the gel with a ruler adjacent to the molecular weight markers as a reference. 3. Alkali transfer buffer
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