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- 上海
- 用标记的DNA或RNA为探针
- 2025年12月31日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称：
原位杂交实验
- 提供商：
上海英拜生物科技有限公司
标记探针迅速发展。
1、原位杂交（digaoxin）实验流程
- 蛋白酶K处理
- 预杂交
- 探针变性
- 杂交
- 洗涤
- 消化残余的RNA
- 封闭液封闭30min。
- 抗体孵育1~2h。
- 洗涤
- 显色BCIP/NBT显色液加至标本上避光显色20min。若无背景出现可继续显色过夜。
- 核固红复染，充分自来水冲洗。
- 梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树脂封片，光镜观察拍照。
2、荧光原位杂交实验流程（FISH）
1、脱蜡
2、蛋白酶处理
3、变性
4、杂交
5、杂交后水洗
6、检测
7、扩增
8、DAPI封片，荧光显微镜拍照。
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- 内容
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文献和实验一质粒制备 1质粒的转化和扩增 1.1制备XL1-Blue感受态细菌 1．取400uLXL1-Blue菌种加入到含200mlLB培养基的锥形瓶中，37℃、100rpm培养4h，离心，倒置，以冰冷的0.1mol／LCaCl_2重悬细菌，冰浴30min，离心，弃上清，倒置，再加4ml(含15％甘油)冰冷的CaCl2重悬细菌，分装(200μ／tube)，-80℃保存。 2．转化
原位杂交组织（或细胞）化学 （In situ Hybridization Histochemistry，ISHH） 简称原位杂交（In Situ Hybridization），属于固相分子杂交的范畴，它是用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶核酸的不同，原位杂交可分为DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。 根据探针的标记物是否直接被检测，原位杂交又可分为直接法和间接法两类。直接法主要用放射性同位素、荧光及某些酶标
原位杂交组织(或细胞)化学 (In situ Hybridization Histochemistry，ISHH) 简称原位杂交(In Situ Hybridization)，属于固相分子杂交的范畴，它是用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所用探针和靶 核酸的不同，原位杂交可分为DNA-DNA杂交，DNA-RNA杂交和RNA-RNA杂交三类。根据探针的标记物是否直接被检测，原位杂交又可分为直接法 和间接法两类。直接法主要用放射性同位素、荧光及某些酶标
