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Brdu 5-溴-2'-脱氧尿
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-20
一年
大量现货
上海经科化学科技有限公司
100mg
供应商:上海经科化学科技有限公司
服务热线:400-0199-638
QQ:472482400(上海经科)
微信号:shjkchem
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名称:Brdu 5-溴-2'-脱氧尿苷检测试剂盒 货号:WB4102 规格:100mg 价格:168元用途:生化试剂>生化试剂
Brdu 5-溴-2'-脱氧尿苷检测试剂盒
产品简介:
BrdU(5-Bromo-2-deoxyUridine),即5-溴脱氧尿嘧啶核苷,是胸腺嘧啶核苷(T)类似物,可以通过竞争替代T掺入DNA合成(S期)。活体注射或细胞培养时加入BrdU,而后利用抗BrdU抗体和抗体连接酶或荧光素作为指示系统,当处于旺盛分裂的细胞掺入BrdU后,即可检测出含有BrdU的细胞,并以此判断合成细胞的数目。同时结合其它细胞标记物双重染色,可判断出增殖细胞的种类,增殖速度等,对研究细胞动力学有重要意义。BrdU掺入定位准确,阳性结果表达了S期细胞新合成DNA的水平,而且受细胞内外环境影响小,标记不会丢失。本产品适用于各种细胞和组织切片的细胞增殖检测。
包装内容:
产品货号
产品名称
规格
保存方式
WB4102-1
破膜液
30ml
4℃保存6个月
WB 4102-2
封闭液
WB 4102-3
4%多聚甲醛
常温保存6个月
WB 4102-4
1M Hcl
WB 4102-5
Anti-BrdU(mouse mAb)
50ul
-20℃保存12个月
注意事项:
1、本试剂盒试剂如经常使用可按上表的保存方式保存。如长期不用,可放-20℃保存。
2、BrdU的浓度和处理时间与细胞种类有关。肿瘤细胞需要的浓度和时间都较低,成纤维细胞或上皮细胞等增殖较慢的细胞需要提高浓度并延长作用时间,浓度范围为20--100 uM,作用时间为40 min--4h ,可根据细胞的种类进行调整。
下表为测试的常用细胞处理浓度及时间,仅供参考。
细胞名称
Brdu浓度(uM)
孵育时间(min)
A549
40
Hela
NRK-52e
Skov3
80
120
H9C2
3、为保证最佳实验效果,建议使用本公司生产的其他配套试剂:4%多聚甲醛(WB 1101);苏木素染液(WB 1004);DAPI染液(WB 1012);二抗;DAB显色试剂盒(WB 1211),抗荧光淬灭封片剂(WB 1401)。
BrdU免疫组化(免疫荧光)操作说明
将盖玻片用洗洁剂清洗干净,泡在75%的酒精中静置10min。然后在酒精灯上将酒精烧干,将烧干的盖玻片放在六孔板中,待冷却后将细胞悬液(约1-2×104个细胞)滴加在盖玻片上。5h后轻轻补加1ml培养基,置37℃ 5%CO2 培养箱中培养过一夜。待细胞贴在玻片上良好生长后每孔避光加入1 ml 含有BrdU的培养基(BrdU的具体浓度见注意事项),于培养箱中孵育40 min后即可。
NRK-52e细胞标记BrdU(红光), DAPI(WB 1012)染核,二抗用Cy3标记的山羊抗小鼠(WB B21301)。
取实验动物,按照BrdU 50mg/kg的浓度,腹腔注射给药。共4次,每次间隔2小时,最后一次给药24小时后,处死动物。
将组织常规脱水包埋后做石蜡切片后进行免疫组化检测。
大鼠肠组织标记BrdU,DAB显色。
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