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参考说明书
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参考说明书
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参考说明书
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大量
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上海羽朵
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50次
产品说明书(中文版)
主要用途
纯化线粒体氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂是一种旨在通过使用自由基探针光泽精,捕获线粒体中的活性氧族,使发光物氧化降解并发光,在化学发光仪(Luminometer)的帮助下定量检测纯化线粒体活性氧族(超氧自由基阴离子)的生成和数量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种生物体线粒体组分的活性氧族的检测。可以被用于细胞凋亡、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,性能稳定,检测敏感。
技术背景
超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡,甚而导致诸如男性不育、冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。线粒体是真核细胞的膜性细胞器,是产生活性氧、进行氧化还原反应的重要场所。光泽精(lucigenin),又称硝酸双-N-甲基吖啶翁(bis-N-methyl acridinium nitrate),是一种带正电荷的发光剂,单价还原后生成光泽精自由基,再与超氧自由基阴离子反应生成不稳定的中间物光泽精二恶二酮,由此分解成电激发状态(N-甲基丫啶酮),通过释放光子,回复到基态。光泽精作为探针,其正电荷与线粒体内膜上的负电荷作用,可以特异性检测线粒体超氧自由基阴离子,其发光强度与超氧自由基阴离子水平成正相关。
产品内容
缓冲液(Reagent A) 毫升
发光液(Reagent B) 毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里,发光液(Reagent B)严格避免光照;有效保证6月
用户自备
1.5毫升离心管:用于线粒体样品操作的容器
恒温水槽:用于样品孵育
测试管或黑色96孔板:用于发光检测用的容器
化学发光仪:用于检测化学发光
详细实验步骤请咨询客服!!!
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的过氧化氢生成量[15](15) ; ;自由基的检测方法很多,目前主要有ESR,HPLC,化学发光法以及分光光度法,我看了一点文献,我困惑的是,我要测定细胞中的超氧阴离子和羟自由基,我想用荧光分光光度法或者化学发光法,可是我发现一些反应体系要在酸性条件下反应(比如有的里面就有硫酸)。这对于细胞应该有损伤啊~还有怎样处理细胞~希望对于自由基检测有经验的战友多多指导,也希望希望做自由基检测的新手一起交流.有国外文献提到,DCFH容易自氧化,不稳定,还有正象你文献所说一样,DCFH所反映的是线粒体内活性氧










