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- 2025年07月16日
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线粒体呼吸链复合物II活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸－辅酶Q还原酶）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物二氯酚靛酚，通过反应系统测定样品中二氯酚靛酚还原后吸光峰值的变化，即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的琥珀酸－辅酶Q还原酶的特异性活性检测。可用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。
技术背景
线粒体呼吸链复合物II，通常称为琥珀酸－辅酶Q还原酶或琥珀酸脱氢酶（Succinate-Coenzyme Q Reductase；Succinate Dehydrogenase），是线粒体电子传递链与三羧酸循环链接的载体：含有四个亚单位，包括共价结合的辅基黄素腺嘌呤二核苷酸（flavin adenine dinucleotide；FAD）和三个铁硫中心（Fe-S clusters），以及细胞色素b亚单位，其最特征性的酶活性是丙二酸钠敏感的琥珀酸－辅酶Q还原酶。复合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化为富马酸（fumarate），线粒体内电子由供体FAD传递到内膜上辅酶Q受体（泛醌；ubiquinone）的能量转移反应，进行呼吸链传递。该酶异常会导致嗜铬细胞瘤（paraganglioma）、肾上腺嗜铬细胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh综合征。基于琥珀酸底物，通过琥珀酸－辅酶Q还原酶的催化，氧化为富马酸，同时氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）转化为还原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度仪下产生吸光峰值的变化（600nm 波长），由此定量测定琥珀酸－辅酶Q还原酶的特异活性。其反应系统是：
产品内容
缓冲液（Reagent A） 毫升
反应液（Reagent B） 毫升
阴性液（Reagent C） 毫升
底物液（Reagent D） 微升
产品说明书 1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；反应液（Reagent B）和底物液（Reagent D），避免光照，有效保证6月
用户自备
比色皿：用于比色的容器
分光光度仪：用于比色分析
培养箱：用于孵育反应物
详细实验步骤请咨询客服！
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文献和实验细胞色素还原酶（系统） cytochrome reductase（system）
还原细胞色素 c的氧化还原酶系统的一种。有许多报告指出，线粒体的酶系统构成呼吸链的一部分，可用 NADH或琥珀酸还原细胞色素 c。用胆酸处理线粒体可获得。认为是在 NADH－泛醌，琥珀酸 -泛醌，泛醌－细胞色素 c之间发生由三个颗粒组成的电子传递，含有细胞色素 c、细胞色素 b、醌、非血红素铁和磷脂等。以前所了解的 NAD－细胞色素 c还原酶可以看成是人工提纯处理的。
100 0 0 从表中可以看出，FP、Cyt b位于抗霉素A阻断部位之前，Cyt c、cl、aa3位于阻断部位之后。用不同的抑制剂作此实验，就可以确定呼吸链中各种传递体的排列顺序。 4.在体外实验中，将线粒体分成各种复合物，检测其各自催化的反应，再将其重组，检测其催化能力。 美国格林(Green)等实验室成功地将呼吸链分离成具有催化活性的四种复合物以及CoQ和Cytc.检测各个复合物的功能发现：
由非血红素铁原子与硫原子构成。不同簇的铁硫中心和蛋白质结合成的各种铁硫蛋白，通过 Fe3 Fe2 的循环参与电子的传递。微生物和动植物组织中都存在铁硫蛋白，在线粒体内膜上常和黄素酶或细胞色素结合成复合物。在从 NADH（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型）到氧的呼吸链中有多个不同的铁硫中心，有的在 NADH泛醌还原酶中参与电子从 NADH传递到泛醌的反应；有的与细胞色素 b及 c1有关。铁硫中心也与琥珀酸脱氢酶相结合。有的铁硫蛋白还在叶绿体中参与光合作用的电子
