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- 文献和实验
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参考说明书
- 保质期:
参考说明书
- 英文名:
参考说明书
- 库存:
大量
- 供应商:
上海羽朵
- 规格:
10次
动物细胞/组织线粒体 DNA 萃取试剂是一种旨在通过物理或化学破膜及离心处理方法,从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体细胞器,然后进一步生物酶处理以获得高质量的线粒体 DNA 的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适合于各种动物软组织(肝或脑组织)和培养细胞的线粒体核酸成分的分离。用于后续的杂交、克隆、酶切、PCR 分析等。产品即到即用,操作简易,性能稳定,无核酶污染,萃取纯度和产量皆高。
技术背景
线粒体细胞器的研究是现代细胞生物学的最重要的课题之一。线粒体成为生物衰老、古生物、细胞凋亡、肿瘤、HIV、老年痴呆症、糖尿病、肌肉疾病等研究的主要对象。线粒体 DNA 的分离和定量以及突变分析是研究中必不可少的。
产品内容
清理液(Reagent A) 毫升
裂解液(Reagent B) 毫升
净化液(Reagent C) 毫升
强化液(Reagent D) 毫升
保存液(Reagent E) 毫升
破膜液(Reagent F) 毫升
酶解液(Reagent G) 微升
萃取液(Reagent H) 毫升
浓缩液(Reagent I) 毫升
沉淀液(Reagent J) 毫升
纯化液(Reagent K) 毫升
缓冲液(Reagent L) 毫升
产品说明书 1 份
保存方式
保存 净化液(Reagent C)、 酶解液(Reagent G)、 萃取液(Reagent H)和 浓缩液(Reagent I)在-20℃冰箱里,其余的保存在 4℃冰箱里,有效保证 6 月
用户自备
HANK 平衡盐缓冲溶液(YD12028)或 PBS 缓冲溶液(YD12033):用于清理细胞胰蛋白酶乙er胺四乙酸混合液(YD12024):用于细胞脱离
完全细胞培养液(YD12052):用于细胞处理所需的培养基
15 毫升锥形离心管:用于线粒体初步制备的容器
50 毫升锥形离心管:用于细胞或组织收集后离心或清洗处理的容器涡旋震荡仪:用于混匀
4℃台式离心机:用于沉淀细胞和核酸
4℃超速离心机:用于分离细胞器成分微型台式离心机:用于沉淀核酸DOUNCE 匀浆器:用于裂解细胞58℃恒温水槽:用于孵育反应物
详细实验步骤请咨询客服!!!
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文献和实验一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体
以下检测方法:1、线粒体功能2、DNA Cycle3、Caspases4、Annexin V Assay5、DNA Fragmentation Assays基本上涵盖了细胞凋亡的各个期,对各种检测方法的原理和特点做一个简单介绍。线粒体功能检测的试剂盒有深圳达科为公司代理的试剂盒(产品编号为BVK250)和BD公司出售的盒Apo-Alert试剂盒。其检测主要采用阳离子型荧光染料。原理是:正常细胞中,染料可以在线粒体内聚集,发出明亮的红色荧光;而细胞凋亡后,其线粒体膜电位发生改变,染料无法进入线粒体,只能
转移酶在冰上混合后加入。 j. 4度孵育过夜后放37度30min k. PBS清洗终止反应,荧光显微镜观察。 可是还是连阳性对照都没有信号。 请问,哪位做过,指点一下吧,谢谢。 或者发到我的邮箱:weiwangsky@hotmail.com dnazyme 首先,我不是高人没有搞过凋亡研究。 不过,我提醒你一句,商业化的凋亡试剂盒一般都是针对特定阶段。例如,针对细胞膜变化、Caspase酶活性、针对线粒体状态










