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- 提供商:
上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称:
钙蛋白(OCN)ELISA检测实验
- 规格:
96T
钙蛋白(OCN)ELISA检测实验
钙蛋白(OCN)ELISA检测实验 实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中犬骨钙蛋白(OCN)水平。用纯化的犬骨钙蛋白(OCN)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入骨钙蛋白(OCN),再与HRP标记的骨钙蛋白(OCN)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的骨钙蛋白(OCN)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中犬骨钙蛋白(OCN)浓度。
钙蛋白(OCN)ELISA检测实验 组成:
| 试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
| 说明书 |
1份 |
1份 |
|
| 封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
|
| 密封袋 |
1个 |
1个 |
|
| 酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
| 标准品:1350μg/L |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 样品稀释液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 显色剂A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 显色剂B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 终止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 浓缩洗涤液 |
(20ml×20倍)×1瓶 |
(20ml×30倍)×1瓶 |
2-8℃保存 |
钙蛋白(OCN)ELISA检测实验 样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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文献和实验相关专题 ELISA免疫实验技术 Il-8是一种分子 量为8~10kD的多肽,对嗜中性粒细胞,T淋巴细胞、嗜硷性粒细胞具有趋化作用,并可激活嗜中性粒细胞,是一种重要的炎症介质。在严重感染病人的血清中、炎症局部渗出液中都可检测到高水平的IL-8。此外,近年来的研究表明,IL-8可能与各种组织缺血后再灌注损伤的发生有关。我们采用两株自制的单克隆抗体建立了夹心法ELISA用于检测IL-8,敏感性可达156Pg/ml,操作简单,重复性良好
乙烯塑料板,ELISA检测仪,37℃水浴箱,4℃冰箱,CO2孵箱。可调加样器。 ㈣ 注意事项: 1. 包被抗体活性要较高,否则影响本实验敏感性。 2. 经筛选比较,封闭液以1%BSA-PBS为好。 3. 酶标结合物应用前应进行效价滴定,选择最佳工作浓度。 4. 底物应选用灵敏度较高的供氢体如ABTS等。 5. 如有条件,酶标McAb可由生物素-McAb和亲和素-HRP系统代替,以增加实验的敏感性。
liushuitao 比如 骨形态发生蛋白BMP、转化生长因子-β1 TGF-β1 、骨钙素 OCN 、碱性磷酸酶ALP等, 已知这些蛋白,怎么从文库中找到与其对应的RNA或DNA呢? 小弟学临床的,对这些了解较少,现写标书要用,望各位大侠赐教。找的方法步骤越详细越好,不甚感激!:) zhujoker 建议借一本生物信息学的书,比如 生物信息学与功能基因组学 = Bioinformatics










