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文献和实验1. 解离前取样、运输、储存注意事项 组织解离成功与否很大程度上取决于样本质量。不同的来源、取样方式、运输和储存条件可能会得到有明显差异的解离效果。一般建议取新鲜组织样本,取样过程尽量快速操作,避开坏死区域,低温保存在适宜的溶液中或短暂时间内进行解离实验,以保证足够好的细胞状态。 对于一些重要组织,当不能取样后立即进行下游解离时,需要将组织暂时储存,避免细胞坏死和凋亡,并防止细胞激活和细胞多能性的变化,以保持细胞的正常生理功能状态。常见的方法是冻存组织样本,但是在解冻后常常会导致大量细胞
cuixueying531 首次来请教,请大家多多帮忙,谢谢 Fasta921 那你为什么选择这样的基因?说出你选择的理由,也许我们大家可以给点建议。呵呵 是你发现的新基因?为什么下这样结论:在正常组织及癌组织都不表达的基因?各种组织细胞类型你都检测了或者你都有文献可供参考了?呵呵 PS:我也好奇,跟贴学习! 落梅风 我也好奇,正常组织和癌组织都不表达
1. 组织解离常用方法 组织解离主要依赖酶解法和机械分离法,或将两者结合以达到最佳效果 (1)酶解法(Enzymatic Digestion) 利用特异性蛋白酶水解构成组织结构的细胞外基质(ECM)和细胞间的连接蛋白,从而将细胞从组织微环境中释放出来。这是目前最主流且高效的解离方法。为防止死亡细胞释放的 DNA 导致细胞聚集,消化液中通常会添加 DNase I。 (2)机械分离法 (Mechanical Dissociation) 通过物理手段,如精细剪切、温和研磨、移液器吹打或自动化仪器震荡
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