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鼎国昌盛
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25g
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文献和实验一、原理deae-sephadex a-50(二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50)为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为pH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。pH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被deae- sephadex a-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通过柱层析,γ球蛋白便可在洗脱中先流出,而其他蛋白则被吸附在柱上,从而便可分离获得纯化的IgG。1、试剂(1)盐析提取的人γ球蛋白(2)0.5N
DEAE-Sephadex A-50 提取法纯化多克隆抗体 DEAE-Sephadex A-50(简称A-50)为弱碱性阴离子交换剂,经过NaOH处理将Cl- 型转为OH- 型后,可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白属中性蛋白,等电点为pH6.85~7.5,其余均属酸性蛋白。在溶液为pH8.0时,酸性蛋白均被A-50 吸附。从而可分离纯化IgG。 1. 批量吸附法 此法可在1天内完成提取过程,纯化前后样品体积变化不大,
(一) 原理 DEAE-SephadexA-50(二乙基氨基乙基-葡聚糖A-50)为弱碱性阴离子交换剂。用NaOH将CL-型转变为OH-型后,可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白(等电点为PH6.85~7.5),其余均属酸性蛋白。在PH7.2~7.4的环境中,酸性蛋白均被DEAE-Sephadex A-50吸附,只有γ球蛋白不被吸附。因此,通过柱层析γ球蛋白便可在洗脱中先流出,而其他蛋白则被吸附在柱上,从而便可分离获得纯化的IgG
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