GR1403-100ML 外源 RNase 清除剂 ( 固相

硝酸纤维膜固相杂交

、葡萄糖1.47g、加水至100ml,0.6kg/cm2 灭菌30min）抗凝。 （2）将血液放入已灭菌的50ml塑料离心管内，加30mlSTMT[0.32mol/L蔗糖、10mmol/l Tris-HCl(pH7.5)、5mmol/L MgCl2 、1%Triton –X 100]，轻轻上下振荡至透明，红细胞 完全溶解。 （3）冰浴10min，离心，3000rpm，10min。弃上清，STMT重复处理1～3次。 （4）弃上清，白色沉淀物加10ml STE[0.1mol/L

在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略

的稳定性 mRNA的快速降解势必影响蛋白质的产生。因此在这一部分重点阐述决定mRNA稳定性的因素，这将在E.coli高效表达外源基因中有实际应用。在E.coli中有多种不同的RNase参与mRNA的降解，其中包括内切核酸酶（RNase E,RNase K和RNase III）和3’外切核酸酶（RNase II和多聚核苷酸磷酸化酶[PNPase]），目前尚未在原核细胞中发现5’外切核酸酶[110]。mRNA的降解并非由非特异性的外切核酸酶随机剪切而引起，因为在mRNA的长度和半衰期之间并没有反向

【原创/分享】GS115毕赤酵母表达外源蛋白较详细步骤！！！（从验证到阳性克隆的筛选）

菌体 按照每毫升菌体加：溶液Ⅰ100ul（冰浴5min剧烈振荡） 溶液Ⅱ200ul（冰浴5min轻轻混匀） 溶液Ⅲ150ul（冰浴5min轻轻混匀） 12000rpm×5min 上清加入RNAse（10mg/ml）37度1hour后加入等体积酚：氯仿（1：1），剧烈振荡 12000rpm×5min 取上清，加入等体积氯仿，12000rpm，5min 上清加1/10体积3MNaCl和2体积无水乙醇 －20度沉淀10min后，用70％乙醇洗涤，晾干后加入适量适量双