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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
见说明书
- 亚型:
见说明书
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20oC 至 -80oC
- 克隆性:
Polyclonal
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Homo sapiens (Human)
- 宿主:
Rabbit,兔
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
200ug/ml
- 靶点:
见说明书
- 抗体英文名:
Polyclonal Antibody to Vanin 3 (VNN3)
- 抗体名:
血管非炎性蛋白3(VNN3)多克隆抗体
- 规格:
100ug/200ug
www.klbscience.com
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
选择动物时应考虑抗原和免疫动物的种属差异,种系相近会影响免疫效果,一般要求动物适龄,健康,体重符合要求。常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。动物接受免疫的乳液量小鼠为1.0~2.0 ml, 家兔为2~4 ml。添加佐剂可帮助抗原在注射部位缓慢释放,增加免疫效果,常用佐剂为弗氏不完全佐剂。
初次免疫后要经过2~3次以上的加强免疫以形成较高水平的IgG抗体。初次免疫和再次免疫之间,小动物一般间隔10~14天,大动物间隔60天左右。在每次加强免疫后,进行抗血清效价测定,当效价达到理想状态时,便采集抗血清。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。也可采用尾巴或眼眶取血,静置待血液凝固成血块收缩析出血清,3000rpm离心15 min,取上清。这个过程要注意动物的养护,耗时长,但得率低,得到的血清还需进一步的纯化。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
由于多克隆抗体具有成本低、制备周期短且制备步骤相对简单、可识别多个表位等优点,在科研领域应用非常广泛。以上就是关于多克隆抗体制备的一个基本流程。供大家参考。
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文献和实验实验动物中央研究所引引到中国医学科学院实验动物研究所。2001年从美国再次引种。 应用: 是肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究中常用的品系。心肌梗死模型、糖病模型、肾衰模型等等多种模型构建,或单克隆、多克隆抗体制备。 (1) 心血管研究:饮食引起的动脉粥样硬化; (2) 发育生物学研究:眼部缺陷、淋巴组织缺陷、造血缺陷、骨骼缺陷; (3) 糖尿病和肥胖症研究:高血糖(饮食诱导的)、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、肥胖与糖尿病、Ⅱ型糖尿病; (4) 血液学研究:造血缺陷、免疫,炎症和自身免
免疫应答,与 免疫应答产物即抗体和效应细胞,在体内或体外发生特异性结合的物质。 1)抗原的性质 ① 异物性。它是抗原所具有的特性,机体对进入体内的某些异物,异体大分子物质可产生免疫应答。目前生物制剂公司利用这一原理生产出许多适合于临床诊断的抗体。但是,并非所有的异物都是抗原。例如矽尘等一些生物性高分子聚合物,它们不会刺激机体的免疫系统产生相应的抗体物质,而只是肺对吸入的矿物性和有机粉尘的非肿瘤性反应[1]。矽肺是肺吸入矽颗粒沉积的结果,也是机体对另一
量不同,因而表达 也不同。 该抗体可用各种方法检测,但最好用真空负压LSAB法。产品说明书注明该抗体稀释度1:50至1:100,我们使用为1:100。 ②单克隆小鼠抗人细胞角蛋白,克隆为LP34。该抗体的使用范围,检测各种组织基本上与①号抗体相同,但效果不如①号。 ③单克隆小鼠抗 人细胞角蛋白,克隆为35BH11。该抗体的特点是:A,可检测几乎所有的非鳞状上皮包括卵巢腺癌,胃肠道腺癌,甲状腺癌,肝癌, 子宫癌,肾癌等。B、不与鳞状上皮起反应。C、对膀胱癌,鼻咽
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