相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Alexa Fluor®488 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 规格:
1mg
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
| Alexa Fluor®488 NHS Ester (Succinimidyl Ester) Alexa Fluor 488-N-羟基琥珀酰亚胺酯 |
40779ES03 |
1 mg |
2,768.00 |
产品描述
Alexa Fluor® 488是一种亮绿色荧光染料,具有水溶性和较强的pH稳定性(pH4-10),可被488 nm激发产生信号稳定的荧光,常作为一种细胞标记物偶联到抗体、多肽、蛋白、示踪剂和其他底物上广泛用于细胞成像和检测。
Alexa Fluor® 488 NHS Ester,即含N-羟基琥珀酰亚胺(N-Hydroxysuccinimide)活化基团的Alexa Fluor 488,可直接与生化分子上的氨基(-NH2)反应形成稳定的酰胺键,主要是伯胺,可用于标记任何含伯胺的蛋白、多肽、氨基修饰的寡核苷酸或者其他含氨基的生物分子。
产品性质
| 荧光团(Fluorophore Label) |
Alexa Fluor® 488 dye |
| 活性基团(Reactive Group) |
NHS ester |
| 反应性(Reactivity) |
伯胺(R-NH2) |
| 分子式(Molecular Formula) |
C25H15Li2N3O13S2 |
| 分子量(Molecular Weight) |
643.4 |
| 外观(Appearance) |
粉末 |
| Ex/Em |
494/517 nm |
| 摩尔吸光系数(Extinction Coefficient) |
71,000 cm-1M-1 |
| 校正因子(CF280) |
0.11 |
| 结构式(Structure) |
|
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃干燥避光保存,有效期6个月。
注意事项
1)NHS ester基团对湿度非常敏感,务必干燥保存产品。使用前产品需放到室温回温至少20 min。
2)NHS ester基团的水解发生在水溶性缓冲体系属于竞争性反应。对蛋白/多肽伯胺的连接反应建议在pH 7-9范围内进行。
3)不要使用任何含伯胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸、铵盐、或其他稳定蛋白如BSA等。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!
标记方法(以IgG为例)
【注意】:该染料可标记任何蛋白,此方案是以IgG为例进行优化的,可根据需要按照该方案调整合适的体系。
1. 用1ml不含氨基的合适的缓冲液(eg.100 mM碳酸氢钠缓冲液)充分溶解约10 mg蛋白。
【注】:① 标记的效果具有浓度依赖性,当浓度低于2 mg/mL,会严重影响标记效率,标记蛋白浓度需控制在2-20 mg/mL。
② 标记体系应避免任何含氨基的底物,如Tris、glycine、铵盐、或其他稳定蛋白如BSA等,如待标记的蛋白溶液中含有上述物质的污染,则需透析到10-20 mM的磷酸盐缓冲液(PBS)中,再向每毫升蛋白溶液中加入0.1 mL 1M碳酸氢盐缓冲液(pH 8.3–9.0)调至所需pH值。
③ 抗体溶液中存在的微量NAN3(<3 mM)或硫汞撒(<1 mM)不会干扰标记反应。
2. 使用前用高质量无水DMSO溶解Alexa Fluor 488-NHS至10 mg/mL。
【注】:Alexa Fluor 488-NHS虽然具有水溶性,但是在水溶液中,会被水解成非活性游离酸。因此一旦溶解,该染料活性就可能减弱,尤其是在水溶液中,本品就会变得很不稳定。
3. 向蛋白样品中缓慢加入50-100 µL Alexa Fluor488-NHS试剂,充分混匀。
【注】:加入Alexa Fluor488-NHS试剂的量在0.5-1 mg。不同的蛋白和标记试剂的标记效果不同,请根据具体情况优化染料与蛋白的比例。
4. 边搅拌边于室温孵育60 min(或更长);
5. 利用合适介质去除未反应的试剂;
6. 测定Alexa Fluor® 488-蛋白标记效率(DOL)和标记浓度。
① 测定A280和A494:利用1 cm路径的比色皿检测标记物在280 nm和494 nm的吸光值,此处可根据需要对样品进行稀释。
② 计算样品中蛋白的浓度:

ε280 is molar extinction coefficient protein(M- 1cm- 1)at 280nm. ε280 of Alexa Fluor 280 is 203,000.
CF is a correction factor to account for absorption of the dye at 280 nm.CF= A280 free dye/Amax free dye . CF280(Alexa Fluor® 488)=0. 11.
Non-IgG proteins will likely have significantly different molar extinction coefficients.
③ 计算 DOL 值:

ε494 is the approximate molar extinction coefficient of the Alexa Fluor® 488 dye at 494 nm. ε494 of Alexa Fluor 280 is 71,000.
HB220428
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
文献和实验偶联物,最大限度的提高了信噪比。图2. CF染料的超强特异性;由于AF染料制备过程中含有大量带负电的磺化基团,容易非特异性结合正电基团,请看AF790 Dye与CF790的条带特异性对比。3. 优异的标记效率生物偶联后的活性染料一般很容易水解,会在运输,操作及储存中带来诸多不便,最终致染料结合效率低下。像Alexa Fluor® dyes,DyLight? dyes and IRDyes®等严重的磺化作用有较强的吸湿性,恶化水解作用等问题。例如: AlexaFluor® 488 在应用时琥珀酰亚胺脂酯
Vybrant® DyeCycle Violet Stain
Fluor® 488 and PE channels Eliminate or correct for cell aggregates during data analysis using gating or modeling software Human and rodent stem cells efflux Vybrant® DyeCycle™ Violet stain, and this is the basis for the Side Population
技术原理与方法|超级色差校正物镜 PLAPON60XOSC 在脑组织四重免疫荧光分析中的应用
种类型的荧光抗体在单个标本中准确展示荧光标记分子的共定位情况。 PLAPON60XOSC 和 UPLSAPO60XO 的性能比较 2. 超级色差校正物镜的应用-脑组织的四重免疫荧光 图 1. 脑组织的四重免疫荧光。 VIAAT 染色(Alexa Fluor405,蓝色);CB1 染色(Alexa Fluor488,绿色);VGluT3 染色(Cy3,红色);DGLα染色(Alexa Fluor647,白色)。 大麻素合成酶 DGLα(白色)和大麻素受体 CB1(绿色)聚集在小鼠
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










