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- XFP1620
- 2025年07月15日
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蛋白类相关产品如下：
1 动物总蛋白提取
2 植物总蛋白提取
3 真菌总蛋白提取
4 细菌总蛋白提取
5 包涵体纯化
6 修饰蛋白纯化
7 His蛋白纯化
8 GST蛋白纯化
9 其他标签蛋白纯化
10 标签蛋白切割酶
11 蛋白浓度测定
13 蛋白酶抑制
14 蛋白样品污染清除
15 SDS-PAGE
16 长效期SDS-PAGE
17 Tricine-SDS-PAGE
19 蛋白质分子量标准
20 蛋白质PAGE胶回收
21 PAGE胶染料
22 Western Blot
23 Western Blot AP检测
24 Western Blot HRP检测
25 Western Blot 胶体金检测
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文献和实验glacierna6 如果是做western blot，有个电转的过程，蛋白可以和NC膜比较牢固的结合。 但是如果我前面步骤都不做，直接点二抗到NC膜上呢，放置10分钟，能否牢固结合？ 如果加封闭液，用摇床晃或者不晃，会不会把二抗从膜上晃下来（假设是没有饱和结合的）？ 谢谢高人指点！ shb-sangon 直接点二抗到NC膜上(膜下放置滤纸），放置10分钟，自然风干，能牢固结合。 用无蛋白封闭液
中。将预冻的冷却装置放入槽内。 缓慢倒入约650 mL转膜缓冲液。 （10）盖好盖子，接上电源。根据蛋白分子量来调节工作电流，一般使用100 V（350mA），转移60 - 90 min。 （11）转膜结束后，断开电源，拆卸转膜夹子，逐一掀去各层。将膜用1 × 丽春红染色5 min，用水冲洗3 次，观察蛋白转印是否完全。同时也可将凝胶用考马斯亮蓝染色，胶上无蓝色条带则说明蛋白转印完全。 （12）免疫反应： I 封闭：用镊子将膜移至含有25 mL 封闭液的平皿中，用脱色摇床室温缓慢摇匀
封闭及杂交 在做杂交时，个人建议：还是使用杂交袋进行一抗和二抗的孵育，这样节约抗体。 操作开始： 1. 将膜用 TTBS 从下向上浸湿后，移至含有封闭液的平皿中，室温下脱色摇床上摇动封闭 1 h。必要时可先用丽春红染色（2%乙酸，0.5%丽春红的水溶液）观察蛋白条带，再用去离子水和 TTBS 将丽春红洗脱后封闭，如用蛋白 marker 则可省略此步。 2. 将一抗用 PBST 稀释至适当浓度（在 1.5 ml 离心管中）；撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验
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