【求助】请教关于蛋白和NC膜结合的问题
丁香园论坛
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如果是做western blot，有个电转的过程，蛋白可以和NC膜比较牢固的结合。
但是如果我前面步骤都不做，直接点二抗到NC膜上呢，放置10分钟，能否牢固结合？
如果加封闭液，用摇床晃或者不晃，会不会把二抗从膜上晃下来（假设是没有饱和结合的）？
谢谢高人指点！
但是如果我前面步骤都不做，直接点二抗到NC膜上呢，放置10分钟，能否牢固结合？
如果加封闭液，用摇床晃或者不晃，会不会把二抗从膜上晃下来（假设是没有饱和结合的）？
谢谢高人指点！
直接点二抗到NC膜上(膜下放置滤纸），放置10分钟，自然风干，能牢固结合。
用无蛋白封闭液（PW040），用摇床轻晃，不会把二抗从膜上晃下来。
用无蛋白封闭液（PW040），用摇床轻晃，不会把二抗从膜上晃下来。
直接点二抗到NC膜上是可以通过吸附结合的，在适当离子强度的缓冲液中也不会被洗掉，通过这样可以自己制作简单的分离柱。
非常感谢上面两位的指点，可是我做出来得情况是浓的还有显示，低浓度的就看不见了呢
我不用封闭液时，低浓度也能看见的
话说，发光底物自身的亮度会比较大么？
我不用封闭液时，低浓度也能看见的
话说，发光底物自身的亮度会比较大么？
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