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复蒙
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提供有效引物（2-5OD）
未经物种测序的基因，即同源设计
样品要求:提供目的物种的基因组DNA或cDNA标本，干冰或
供货时间:30个工作日.
上海复蒙基因生物科技有限公司
地址：上海市邯郸路100号54乙106—
电话：021-51262076 传真：021-51262077 电子邮件：service@fmgbio.com
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文献和实验哺乳动物细胞中分析RNAi反应 ·快速的结果－立刻产生RNAi数据·有效阻断－酶切的siRNA序列库（d-siRNA）可能包含大量高效的双链siRNA·节省时间－不需要设计和预先确定最佳的靶定序列·成本低廉－一个试剂盒可以进行数百次实验 Lipofectamine™ 2000 最广泛被使用的哺乳动物细胞siRNA转染试剂 ·已证明的转染－提供成功的基因
（Promega）；Genomyx LR 、 Genomyx SC、DNAThermal Cycler（Perkin Elmer）1.3 总RNA的制备按试剂盒提供的方法分别提取三种细胞的总 RNA,以 RNase-free DNase I（终浓度80 000 U/L）除去其中污染的 DNA,经甲醛变性凝胶电冰鉴定其完整性，并以紫外分光光度计检 测其纯度1.4 mRNA差异显示1.4.1 逆转录反应选择锚定引物[T7（dT12）AP(anchored prime rs，AP)]，序
本文根据自身实验经验总结，针对 PCR 实验过程出现的问题举例，提供可实施的解决方法。并根据经验列举了提高 PCR 反应特异性的方法。 问题 1：假阴性（无扩增产物） 现象：正对照有条带，样品无条带 可能原因： · 模板：含有?Taq 酶抑制剂、杂蛋白，模板上样量低或模板降解 · 引物：引物降解，引物设计不合理 · 试剂：酶失活，buffer 不合适 · 反应条件：退火温度高，延伸时间短 解决方法： · 纯化模板并重新提取，并检测模板是否含有抑制剂 · 重新设计引物并低温保存 · 优化
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